【摘 要】
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食管癌是人类常见的恶性肿瘤之一,因其发现较晚、又缺乏有效的治疗方法,5年生存率小于10%.包括我们在内的多家实验室研究发现环氧化酶-2(COX-2)食管癌中表达上调并与肿瘤的预
【出 处】
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中国协和医科大学 北京协和医学院 中国医学科学院 清华大学医学部
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食管癌是人类常见的恶性肿瘤之一,因其发现较晚、又缺乏有效的治疗方法,5年生存率小于10%.包括我们在内的多家实验室研究发现环氧化酶-2(COX-2)食管癌中表达上调并与肿瘤的预后有关,在肿瘤的发生发展中起着重要的作用.本研究将对食管鳞癌上调基因COX-2在食管癌细胞系中的作用及其机制进行初步探讨.我们针对COX-2基因设计并合成了三个siRNA靶序列,构建了siRNA表达质粒pSilencer2.1-U6 neo,用脂质体转染的方法以质粒为载体将SiRNAs导入COX-2表达较高的食管鳞癌细胞系KYSE450细胞内,通过G418筛选,获得了稳定克隆,经过RT-PCR和免疫细胞化学鉴定,得了COX-2表达抑制程度达70~90%的稳定克隆,为研究COX-2在食管癌细胞系中的功能建立了模型.用COX-2选择性抑制剂(NS-398)和COX-1选择性抑制剂(SC-560)处理食管鳞癌细胞系KYSE150、KYSE450、KYSE510,以MTT、流式细胞术、ELISA等方法观察药物对细胞的生物学影响.我们发现,这两种药物(浓度)均对细胞有生长抑制的作用且抑制了COX下游前列腺素的生成;两者均能导致G0/G1期阻滞而影响细胞的生长.
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