【摘 要】
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卵泡刺激素(FSH)是垂体前叶促性腺细胞分泌的一种糖蛋白激素。FSH在卵泡成熟和精子的形成过程中发挥着重要作用。因此，重组FSH在临床上常用于治疗不孕不育症。但是在临床使用
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卵泡刺激素(FSH)是垂体前叶促性腺细胞分泌的一种糖蛋白激素。FSH在卵泡成熟和精子的形成过程中发挥着重要作用。因此，重组FSH在临床上常用于治疗不孕不育症。但是在临床使用前需要对FSH产品的生物活性进行检测。FSH生物活性的测定在多国药典中都采用雌幼大鼠卵巢增重法，此种测定方法资金投入较多，动物实验结果差异大，不符合动物伦理学发展趋势，所以亟需一个体外替代方法。 FSH发挥效应时通过与细胞膜FSH受体(FSHR)结合，使细胞内cAMP生成增加，激活蛋白激酶A(PKA)，后者使CREB磷酸化，与靶基因启动子区域的cAMP反应元件(CRE)结合而促进靶基因转录。我们根据这一信号传导通路，采取DNA重组技术，构建表达人FSHR的慢病毒质粒和表达CRE荧光素酶报告基因的慢病毒质粒，通过转染293T细胞验证FSHR的功能，并选择对FSH刺激反应较强的CRE荧光素酶报告基因质粒。通过制备相应的慢病毒感染293T细胞，建立表达FSHR和CRE荧光素酶报告基因的稳转细胞，通过检测FSH样品刺激稳转细胞表达荧光素酶活性的变化，反映FSH的生物活性。我们将进一步分析该方法的特异性和稳定性，并与传统的动物实验方法相比较。 FSH生物学活性的体外测定方法快速、灵敏，有望在将来可以替代传统的动物实验测定方法，用于FSH产品生物学活性检测和质量控制。
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