灵芝孢子粉对急性脊髓损伤模型GAP-43和Survivin表达的影响

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目的:  探讨灵芝孢子粉对大鼠急性脊髓损伤模型的干预作用,并检测灵芝孢子粉对大鼠脊髓组织GAP-43和Survivin含量的变化,进一步研究灵芝孢子粉促进脊髓损伤修复的作用机制。  方法:  SD大鼠随机分为三组:假手术组(n=24),模型组(n=36),灵芝孢子粉组(n=36),三组大鼠,根据标本采集时间又分为六个亚组:1天组,3天组,7天组,14天组,21天组和28天组。假手术组,咬除椎板后即进行缝合,不予打击、给药;模型组及灵芝孢子粉组均制作SD大鼠脊髓损伤模型;模型组和假手术组生理盐水灌胃,灵芝孢子粉组灵芝孢子粉灌胃。假手术组和模型组每天用生理盐水灌胃一次,量为10ml/Kg;灵芝孢子粉组每天用灵芝孢子粉悬浮液(浓度30 g/L)灌胃一次,量为10 ml/Kg。灵芝孢子粉组术后1小时灵芝孢子粉灌胃,此后每天给药一次,1天组、3天组、7天组、14天组、21天组和28天组,各用药至相应时间点。假手术组及模型组,也是术后1小时开始灌胃,灌胃液为生理盐水,方法同灵芝孢子粉组。每组均制作脊髓石蜡切片并进行组织学观察;并用Western-Blot技术检测GAP-43及Survivin蛋白水平的变化。结果用SPSS13.0进行统计学分析。  结果:  ①HE染色显示脊髓损伤后,脊髓有广泛的出血,血肿,血肿的吸收,细胞增殖,胶原瘢痕形成的病理过程。②GAP-43的蛋白水平:GAP-43在各实验组均有表达。模型组及灵芝孢子粉组中各取材时间点GAP-43的表达高于相应时间点假手术对照组(P<0.05)。模型组和灵芝孢子粉组,GAP-43在损伤后1天,较假手术对照组即开始有GAP-43的明显表达,并持续升高,在14天达到高峰,28天仍有表达(P<0.05)。灵芝孢子粉组GAP-43的表达,显著高于模型组在第3,7,14和21天的表达,差异有统计学意义(P<0.05);在第1天及第28天的表达无显著差异(P>0.05)。③Survivin蛋白水平:在各实验组均检测到Survivin的表达。在模型组及灵芝孢子粉组每个采样时间点Survivin的蛋白水平均高于假手术组(P<0.05)。模型组和灵芝孢子粉组,Survivin在损伤后1天,较假手术对照组即开始有明显升高,在第3天达到高峰,28天仍有明显表达(P<0.05)。灵芝孢子粉组Survivin的表达,在第1、3、7及14天的表达高于模型组,差异有统计学意义(P<0.05);但第21天和28天的表达较模型组无统计学意义(P>0.05)。  结论:  灵芝孢子粉参与了损伤脊髓的再生、修复;在损伤脊髓组织中,灵芝孢子粉对GAP-43及Suvivin的表达具有明显促进作用;灵芝孢子粉可能通过促进GAP-43、Suvivin的表达,发挥对脊髓损伤的药理作用。
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