CD4+CD25+FOXP3+调节性T细胞在Graves病及类风湿性关节炎患者中的含量变化研究

• 作 者: 洪强
• 机 构: 福建医科大学
• 出 处: 福建医科大学
• 发表日期: 2010年期
• 关键词: Graves病 FOXP3 调节性T细胞 流式细胞术 TRAb RA OA 关节液

背景和目的1995年Sakaguchi等首先报道在小鼠体内存在组成性表达IL-2Rα(CD₂₅)的CD4+调节性T细胞（Treg）亚群(CD₄⁺CD₂₅⁺Treg),目前大量研究证实其与多种器官特异性和系统性自身免疫病的发生密切相关。Graves病（Graves’disease,GD）又称毒性弥漫性甲状腺肿,在自身免疫性甲状腺疾病（AITD）中最为常见。其发病机制尚未完全明确,目前认为自身抗体的产生可能与基因缺陷相关的Treg功能降低有关。类风湿关节炎（Rheumatoid Arthritis,RA）是一种以多关节炎为主要表现的系统性自身免疫病,其主要发病机制是T细胞介导的免疫反应异常。本研究的目的是通过研究CD₄⁺CD₂₅⁺FOXP3⁺调节性T细胞在Graves病患者及类风湿性关节炎患者中的含量变化情况,探讨CD₄⁺CD₂₅⁺FOXP3⁺ Treg在Graves病及RA诊疗中的作用,为上述两种自身免疫性疾病病因及诊疗分析提供实验依据。研究内容和方法研究内容包含两个部分,一部分为Graves病患者研究,另一部分为RA患者研究。在Graves病研究部分,本研究选择了52例Graves病初诊患者,同时选择33例年龄和性别比例相近的健康体检者做正常对照组。通过流式细胞仪检测Graves病患者在初诊、减药、停药三个阶段检测患者外周血CD₄⁺CD₂₅⁺FOXP3⁺ Treg含量及TRAb含量,比较两者在不同治疗阶段的含量变化及相关性,并将抗甲状腺药物治疗后一年内复发与未复发的Graves病患者在不同治疗阶段的外周血CD₄⁺CD₂₅⁺FOXP3⁺ Treg含量进行回顾性比较分析。在RA患者研究部分,本研究选择了36例近期未使用固醇及免疫抑制药物的RA活动期患者,骨关节炎（Osteoarthritis,OA）对照组为同期就诊我院的30例OA初诊患者,以及前一部分所述的33例健康对照组。通过流式细胞仪检测三组人群的外周血CD₄⁺CD₂₅⁺FOXP3⁺ Treg含量,以及RA组和OA组的关节液中的CD₄⁺CD₂₅⁺FOXP3⁺ Treg含量,并对其进行比较分析。研究结果Graves病组患者外周血CD₄⁺CD₂₅⁺FOXP3⁺Treg含量为（4.00±0.42）%,明显低于健康对照组[（6.65±1.46）%],其差别具有统计学意义（P<0.01）。RIA检测Graves病组患者外周血TRAb含量为（32.50±17.78）U/L,高于健康对照组[（0.28±0.99）U/L],其差别具有统计学意义（P<0.01）。Graves病患者外周血CD₄⁺CD₂₅⁺FOXP3⁺Treg以及TRAb含量在初诊时两者具有显著性负相关（r=-0.696, P<0.01）;而药物治疗后,在减药阶段及停药阶段,两者不再具有相关性（r1=0.05, r2=-0.03,P>0.05 ）。初诊时,Graves病复发组患者外周血CD₄⁺CD₂₅⁺FOXP3⁺Treg含量为（4.11±0.37）%,未复发组患者CD₄⁺CD₂₅⁺FOXP3⁺Treg含量为（3.81±0.44）%,两组差异无统计学意义（P>0.05）;与初诊时结果（4.11±0.37）%相比较,治疗结束时复发组CD₄⁺CD₂₅⁺FOXP3⁺ Treg增加值为（0.97±0.57）%,明显低于未复发组增加值[（2.02±0.62）%],其差别具有统计学意义（P<0.01）。RA组外周血CD₄⁺CD₂₅⁺FOXP3⁺测定值为（5.97±1.17）%,明显低于OA组[（6.81±1.09）%]及健康对照组[（6.65±1.46）%],其差别具有统计学意义（P <0.05）,而后两组结果未见显著性差异（P >0.05）。RA组关节液CD₄⁺CD₂₅⁺FOXP3⁺Treg测定值为（14.93±2.83）%,明显高于OA组[（10.66±2.02）%],其差别具有统计学意义（P <0.01）。RA组及OA组关节液中的CD₄⁺CD₂₅⁺FOXP3⁺含量均显著高于自身外周血（P<0.01）。结论Graves病患者外周血中CD₄⁺CD₂₅⁺ FOXP3⁺Treg表达降低,说明CD₄⁺CD₂₅⁺ FOXP3⁺ Treg在Graves病发病过程中的免疫负调控功能降低,是机体产生自身抗体的原因之一。在传统抗甲状腺药物治疗至TRAb转阴后停药的Graves病患者,若CD₄⁺CD₂₅⁺ FOXP3⁺ Treg含量未能恢复至理想水平,则容易复发。RA患者外周血中CD₄⁺CD₂₅⁺FOXP3⁺ Treg细胞含量减低,表明Treg在RA患者中的负性调控作用减低,可能是促进疾病发生发展的一个不可或缺的因素。但是在膝关节液中,RA患者CD₄⁺CD₂₅⁺FOXP3⁺ Treg细胞含量明显高于自身外周血以及OA患者膝关节液。表明CD₄⁺CD₂₅⁺FOXP3⁺ Treg细胞含量增高更可能为炎症趋化作用后的一个继发性表现。外周血CD₄⁺CD₂₅⁺FOXP3⁺ Treg细胞含量在多种初发的或处于活动期的自身免疫性疾病中均可表现为减低,但在药物干预后或身体局部（如关节腔液）中则表现出不一致性。