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蚓激酶是存在于蚯蚓体内一组具有纤溶活性的蛋白酶，众多的研究表明其具有广泛的生物学功能，作为溶栓类药物其具有副作用小，起效迅速，口服有效等优点，有良好的应用前景。目前临床上应用的蚓激酶制剂是多种成分的混合物，在生产上受到蚯蚓繁殖周期的制约，并且难以分析其中各成分的药理作用。因此本研究尝试以基因工程方法重组表达蚓激酶（P1239），以期得到有活性的重组蚓激酶。此前，我们在国家生物高技术863计划的资助下完成了蚓激酶在大肠杆菌中的表达，但是重组蛋白是包涵体的形式，须经过复杂的变性和复性过程才能获得有活性的重组蛋白。利用酵母表达系统对蚓激酶进行分泌型重组表达不但可以完成真核生物所特有的翻译后的修饰过程，并且重组蛋白是以分泌形式存在于培养上清，有利于后继纯化工作的进行，因此选用酵母系统作为表达宿主，对蚓激酶P1239进行了分泌表达，主要的研究内容如下：
一、蚓激酶在酵母系统中重组表达策略的筛选
二、蚓激酶PI239基因在酵母系统中的重组表达与纯化
三、重组蚓激酶蛋白体内外纤溶活性研究
本研究对蚓激酶在毕赤酵母系统中的重组表达、重组蛋白的纯化及重组蛋白的生物学功能等几方面进行了探讨。建立了毕赤酵母系统中蚓激酶从亚克隆、筛选、表达、发酵、纯化到鉴定的一套工艺路线，尤其双层滤膜法结合摇瓶法筛选高表达酵母工程菌，重组蚓激酶蛋白的补料分批高密度发酵此前未见报道。利用得到的重组蚓激酶蛋白，对其体内外纤溶活性等进行了探讨，从而为以基因工程方法生产重组蚓激酶以及对蚓激酶作用机理等的基础研究奠定了基础。