【摘 要】
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保卫细胞以其特殊的胞壁结构调控着植物的光合作用和蒸腾作用,在植物生命活动中起着重要的作用。当保卫细胞受到外部刺激时,可通过细胞质膜上的某些信号分子激活质膜质子泵,
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保卫细胞以其特殊的胞壁结构调控着植物的光合作用和蒸腾作用,在植物生命活动中起着重要的作用。当保卫细胞受到外部刺激时,可通过细胞质膜上的某些信号分子激活质膜质子泵,促进H+外流,造成细胞质膜超极化,引发细胞内相应的离子浓度变化,进而导致气孔运动。 大量研究结果表明,无论是外源还是内源刺激信号,在保卫细胞中的转导过程几乎都是以Ca2+作为第二信使。本论文以WS生态型拟南芥叶片表皮为实验材料,成功分离出高活性的保卫细胞原生质体,利用膜片钳技术对保卫细胞信号转导过程中质膜质子泵与质膜钙通道之间是否存在一定的关系进行了研究。 由于拟南芥保卫细胞原生质体个体较小（6～9μm）,给分离提取保卫细胞原生质体带来了一定的困难。本论文在总结前人工作的基础之上,结合自己实验材料特点,用撕表皮与两步酶解法相结合,成功分离了保卫细胞原生质体,FDA染色结果表明分离的原生质体活性较高,可供膜片钳实验使用。膜片钳实验结果表明在拟南芥保卫细胞质膜上存在钙离子可通透通道,该通道具有较强的电压依赖性,在膜电位低于-100mV时激活,并随细胞膜超极化程度不断加强,跨膜电流不断增大。尾电流分析发现其逆转电位在0mV左右。质膜质子泵专一性激活剂壳梭孢菌素（fusiccocin FC）处理后,钙离子电流增强。实验结果初步证明,拟南芥保卫细胞质膜上存在超极化激活的可通透钙的离子通道,质膜质子泵对于此类钙通道具有激活作用。
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