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目的：观察CaSR在大鼠心肌肥大动物模型中的表达变化规律；探讨CaSR在大鼠心肌肥大细胞模型中的作用及相关机制。
方法：(1)皮下注射异丙肾上腺素(ISO)复制大鼠心肌肥大的动物模型,通过电镜、HE染色、心肌肥大指数和ANP mRNA表达判定模型成功；观察CaSR基因转录和蛋白水平的表达。(2)血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)复制大鼠心肌肥大的细胞模型,通过细胞直径、蛋白含量、ANP mRNA表达和鬼笔环肽染色判定模型成功；观察CaSR蛋白水平的表达。(3)以CaSR激动剂GdCl3作为干预因素,观察CaSR激活对.AngⅡ诱导心肌肥大的影响；激光扫描共聚焦显微镜测定[ca2+]i的变化。(4)以GdCl3作为干预因素,Western blot、免疫荧光检测钙调神经激酶(CaN)通路、蛋白激酶C(PKC)通路和细胞外信号调节激酶(ERK/MAPK)通路的蛋白表达和各通路阻断剂对心肌肥大的影响。
结果：(1)皮下注射ISO7天后,心肌肥大指数增加：大鼠心肌组织胞浆变宽、心肌纤维增粗、排列紊乱；ANP mRNA合成增加；同时CaSR的基因转录和蛋白表达都明显高于正常对照组。(2)AngⅡ作用48h可显著促进心肌细胞细胞直径、蛋白含量的增加；促进ANP mRNA表达上调和肌原纤维新生肌节的生成；同时CaSR的蛋白表达明显高于正常对照组。(3)GdCl3能够促进AngⅡ所诱发的CaSR蛋白表达增多、[ca2+]i增高,进一步促进细胞直径、蛋白含量增加,进一步促进ANP mRNA的表达上调和肌原纤维新生肌节的生成。(4)CsA(CaN通路阻断剂)和R0318220(PKC通路阻断剂)能够抑制GdCl3引起的上述肥大指标的增加,但PD98059(ERK通路阻断剂)对此没有影响。GdCl3能够促进AngⅡ引起的CaN通路(CaN、NFAT3、GATA4)、PKC通路(PKCα、PKCε)和p-ERK的蛋白表达增多,但对PKCδ没有影响。并且,Ro318220能够抑制CaN通路的蛋白表达增加；CsA、PD98059能够抑制PKC通路的蛋白表达增加。
结论：(1)皮下注射ISO可以成功复制大鼠心肌肥大的动物模型；同时伴有CaSR表达增加。(2)AngⅡ可成功复制新生大鼠心肌肥大的细胞模型；同时伴有CaSR表达增加。(3)CaSR激活能够促进AngⅡ引起的[Ca2+]i增高,促进AngⅡ诱导的心肌肥大。(4)CaN、PKC通路参与CaSR激活促进心肌细胞肥大的信号转导；CaN、PKC和ERK/MAPK信号途径相互交联,可能是诱导心肌肥大的共同通路。