【摘 要】
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目的:观察受体猴在环磷酰胺(CTX)预处理下输注供体猪骨髓(BM)细胞后猪-猴异种角膜移植片的存活情况,探讨可能形成的免疫机制,为探索特异性免疫耐受的诱导方法奠定基础。
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目的:观察受体猴在环磷酰胺(CTX)预处理下输注供体猪骨髓(BM)细胞后猪-猴异种角膜移植片的存活情况,探讨可能形成的免疫机制,为探索特异性免疫耐受的诱导方法奠定基础。
材料及方法:3月龄五指山小型猪(WZS)为供体,恒河猴为受体,建立猪一猴异种角膜移植动物模型。将18只受体猴分为三组,单次骨髓细胞输注(BMT)组,猪-猴角膜移植手术前,CTX预处理下做一次骨髓细胞输注；多次骨髓细胞输注组,CTX预处理下做两次骨髓细胞输注,CTX预处理但不行骨髓细胞输注为对照组。猪-猴角膜移植术后观察各组植片的存活情况,在术前及术后不同时间取猴外周血做混合淋巴细胞反应和嵌合体形成检测,流式系统分析猴外周血淋巴细胞亚群变化,免疫浊度法检测猴外周血免疫球蛋白和补体的变化,各组术后角膜植片发生排斥反应时取材行病理组织学检查和CD3+T、CD4+T细胞及巨噬细胞表达的免疫荧光染色。
结果:单次骨髓细胞输注组猪-猴穿透性角膜移植片平均时间存活为(36.0±4.7)天,多次骨髓细胞输注组为(32.8±6.4)天,对照组为(17.7±3.2)天。单次和多次骨髓细胞输注组较对照组植片存活时间延长,两周后植片水肿明显减轻,术后1个月植片组织病理学见植床、植床与植片交界处、植片中仅少量淋巴细胞浸润,上皮完整,内皮完整,无渗出膜,没有嗜酸性粒细胞浸润；而对照组植片水肿明显,术后1个月组织病理学检查发现植床、植床与植片交界处、植片中大量淋巴细胞浸润,上皮完整,后基质及角膜内皮层破坏,内皮面形成渗出膜,有嗜酸性粒细胞浸润。免疫荧光染色法在三组排斥期的角膜植片均可检测到CD3+T、CD4+T细胞和巨噬细胞的浸润。混合淋巴细胞反应结果显示多次骨髓细胞输注组受体猴对供体脾脏淋巴细胞的反应能力降低,而对照组反应力无变化。单次骨髓细胞输注组术前(骨髓输注后第11天)受体猴外周血CD4+T细胞百分比较对照组升高；全身体液免疫检测发现受体猴外周血抗体IgA在术后1周(骨髓输注后18天)含量较对照组降低,IgM升高,而补体C3、C4浓度在术后2周都降低,差异有统计学意义,P<0.05。
结论:CTX预处理下供体骨髓细胞输注延长异种猪-猴角膜植片的存活；受体对供体的特异性免疫反应降低；免疫排斥反应的发生可能与细胞免疫和体液免疫均有关。
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