针刺“长强”穴对血管性痴呆大鼠海马CA1区突触素蛋白表达及神经元超微结构的影响

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目的:观察针刺“长强”穴对血管性痴呆大鼠学习记忆功能、海马CA1区突触素蛋白表达及神经元超微结构的影响。方法:(1)选取SD大鼠50只,水迷宫实验筛选学习记忆良好大鼠45只。随机分为空白对照组(A组)9只,假手术对照组(B组)6只,手术组30只。手术组采用2-VO方法制造血管性痴呆模型成功后筛选24只,再随机分为非针刺对照组(C组)9只、非穴对照组(D组)6只、“长强”穴针刺治疗组(E组)9只。D、E组选用0.5寸毫针,直刺约0.2寸,留针20min,隔10min行平补平泻提插手法1min,1日1次,10日为1疗程,1疗程结束休息2日再针刺,连续针刺3个疗程。(2)治疗结束行水迷宫检测,后随机取各组大鼠6只开颅取脑,行免疫组化技术检测。最后将空白、模型、“长强”组各剩下3只大鼠开颅取脑,切取海马CA1区,电镜观察其神经元超微结构。(3)行为学和突触素数据均采用单因素方差分析,海马神经元超微结构采用图片对比观察。结果:(1)水迷宫行为学观察:①在水迷宫定位航行实验中,各组大鼠逃避潜伏期分别为:A组(56.45±10.01)、B组(89.60±7.37)、C组(102.00±7.22)、D组(81.11±8.48)、E组(80.66±7.53)秒。其中B组与A组相比,明显长于A组(P<0.05);C组与A组相比,明显长于A组(P<0.05)。②水迷宫空间探索试验中,各组大鼠第一象限停留时间分别为:A组(32.44±9.91)、B组(29.17±8.57)、C组(8.03±1.85)、D组(34.92±28.74)、E组(26.85±17.85)秒。其中C组与A组相比,明显少于A组(P<0.05);C组与B组相比,明显少于B组(P<0.05);C组与D组相比,明显少于D组(P<0.05);C组与E组相比,明显少于E组(P<0.05)。(2)海马CA1区突触素蛋白表达情况:各组大鼠海马CA1区突触素(SYN)的阳性细胞数分别为:A组(114.50±13.96)、B组(89.50±22.04)、C组(9.16±2.10)、D组(101.83±15.77)、E组(64.66±10.13)个。其中C组与A组相比,明显低于A组(P<0.05);C组与D组相比,明显低于D组(P<0.05);C组与E组相比,明显低于E组(P<0.05)。(3)海马CA1区神经元超微结构:①空白组镜下见神经细胞不规则,核内常染色质均匀分布,细胞内粗面内质网丰富,线粒体较多;神经胶质细胞大部分近椭圆形,细胞核质较大,见少量线粒体和粗面内质网;毛细血管腔规则,内皮细胞核较大,核孔丰富。②模型组:神经细胞内线粒体嵴断裂或消失,溶酶体增多增大,粗面内质网脱颗粒现象明显;神经胶质细胞细胞质减少,髓鞘有肿胀、撕裂、溶解;毛细血管管壁变薄,内皮细胞脱落。③长强组:神经细胞包膜完整,核内常染色质均匀分布,线粒体丰富,线粒体嵴未见明显断裂或缺失,粗面内质网丰富;神经胶质细胞细胞器较少,髓鞘未见明显肿胀,撕裂、溶解;毛细血管腔规则,可见内皮细胞,核孔丰富。结论:针刺“长强”穴可对血管性痴呆大鼠海马CA1区突触素蛋白表达产生影响,进而改善神经元超微结构,提高血管性痴呆大鼠学习记忆能力。
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