【摘 要】
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以该室构建的超嗜热无机焦磷酸酶工程菌为产酶菌株,通过分离纯化得到了电泳纯的超嗜热无机焦磷酸酶.经SDS-PAGE确定其单体分子量为23kDa左右,非变性电泳表明此酶多为聚体.超
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以该室构建的超嗜热无机焦磷酸酶工程菌为产酶菌株,通过分离纯化得到了电泳纯的超嗜热无机焦磷酸酶.经SDS-PAGE确定其单体分子量为23kDa左右,非变性电泳表明此酶多为聚体.超嗜热无机焦磷酸酶的酶学性质研究表明,该酶的最适作用温度为88℃,最适pH为10.3.此酶的最适底物为焦磷酸钠,与已知的无机焦磷酸酶相比,该酶对PPPi的水解能力较强,表明其底物作用范围较宽.该酶具有极强的热稳定性,90℃时半衰期约为15小时.通过不同浓度变性剂对酶构象及活力的影响推测,酶在变性过程中可能形成中间体.此酶经8M脲变性后仍具有30﹪的残余活力,酶复性后活力可恢复至80﹪以上,表明此酶对变性剂具有很强的抗性.
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