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目的:本实验拟建立两种不同生长方式的大鼠肝癌模型,将纳米炭注射液应用到两种肝癌模型手术中,研究纳米炭注射液,术中对肝癌切缘和淋巴引流示踪的效果,探讨纳米炭注射液肿瘤示踪对肝癌根治手术的价值,为提高肝癌临床治疗水平探索新的方法。方法:选用Walker256细胞株(大鼠乳腺癌细胞),分别采用种植法和注射法制作两种不同生长方式的肝癌大鼠模型:膨胀和浸润型肿瘤模型,模拟临床人体肝癌。以人体无瘤肝实质切除率(parenchymal hepatic resection rate,PHRR)理论值确定肝癌大鼠模型的切缘标准做参照。两种模型分别设立实验组和对照组,每组各30例,实验组为纳米炭注射液术中瘤内注射示踪手术组,对照组为常规手术组。观察实验组肿瘤和淋巴示踪效果。实验组与对照组均切除大鼠肝癌,清扫局部淋巴结,获取实验标本。测量每例肝癌标本的最小切缘,记录清扫淋巴结数量、大小和位置。标本行组织学检查,观察肿瘤边界,癌旁肝组织,于肝癌标本边缘1mm范围内查找肿瘤细胞,记录切缘肿瘤细胞阳性例数。两种模型分别进行实验组与对照组数据的统计学分析。结果:纳米炭注射液在大鼠肝癌内注射后,可向癌旁正常肝组织浸润,8min内肝癌外周出现可视性黑染带,宽度约35mm,继之出现癌旁组织与肿瘤相关的淋巴管黑染,10min后肝外的引流淋巴管开始出现黑染,并逐渐染黑局部淋巴结。近30min淋巴组织染色趋于稳定,无明显变化。1膨胀型肝癌大鼠实验组与对照组切缘结果最小手术切缘实验组为4.007±0.1799mm。对照组为4.003±0.2918mm。经两独立样本t检验,p>0.05,两组切缘差异无显著性。提示膨胀型肝癌大鼠实验组与对照组最小切缘无差别。实验组与对照组切缘1mm范围内肿瘤细胞阳性率均为0,可能与此动物模型成瘤时间短(14d),肿瘤的微转移和静脉癌栓尚未发生有关。2浸润型肝癌大鼠实验组与对照组切缘结果最小手术切缘实验组为4.083±0.1577mm。对照组为3.777±0.2542mm。经两独立样本t检验,p<0.05,两组切缘差异有显著性。提示浸润型大鼠肝癌对照组与实验组最小切缘距离有差别。实验组30例中7例切缘1mm范围内发现肿瘤细胞,阳性率为23.33%(7/30)。对照组30例中16例切缘1mm范围内发现肿瘤细胞,阳性率为53.33%(16/30)。两组切缘肿瘤细胞阳性率之间差别比较,采用Fisher确切概率法进行统计分析,p<0.05,肿瘤细胞阳性率差异有显著性。提示浸润型肝癌大鼠实验组与对照组切缘肿瘤细胞阳性率有差别。3膨胀型肝癌大鼠实验组与对照组淋巴结清扫结果实验组淋巴结总数457枚,平均15.23±1.382枚,对照组淋巴结总数311枚,平均10.37±1.299枚。经两独立样本t检验,p<0.05,淋巴结清扫数量差异有显著性。提示膨胀型肝癌大鼠实验组与对照组清扫淋巴结数量有差别。实验组清扫淋巴结直径小于1mm者97枚,占21.23%;直径1~2mm者309枚,占67.61%;直径大于2mm者51枚,占11.16%。对照组清扫淋巴结直径小于1mm者44枚,占14.15%;直径1~2mm者219枚,占70.42%;直径大于2mm者48枚,占15.43%。经χ2检验,p<0.05,清扫淋巴结直径构成比差异有显著性。提示膨胀型肝癌大鼠实验组与对照组清扫淋巴结直径构成比不同。实验组清扫淋巴结近距离组159枚,占34.79%;中距离组215枚,占47.05%;远距离组83枚,占18.16%。对照组清扫淋巴结近距离组108枚,占34.73%;中距离组144枚,占46.30%;远距离组59枚,占18.97%。经χ2检验,p>0.05,清扫淋巴结位置构成比差异无显著性。提示膨胀型肝癌大鼠实验组与对照组清扫淋巴结位置构成比无差别。4浸润型肝癌大鼠实验组与对照组淋巴结清扫结果实验组清扫淋巴结总数459枚,平均15.30±1.343枚,对照组清扫淋巴结总数308枚,平均10.27±1.230枚。经两独立样本t检验,p<0.05,清扫淋巴结数量差异有显著性。提示浸润型肝癌大鼠实验组与对照组清扫淋巴结数目有差别。实验组清扫淋巴结直径小于1mm者102枚,占22.22%;直径1~2mm者303枚,占66.01%;直径大于2mm者54枚,占11.76%。对照组清扫淋巴结直径小于1mm者41枚,占13.31%;直径1~2mm者223枚,占72.40%;直径大于2mm者44枚,占14.29%。经χ2检验,p<0.05,清扫淋巴结直径构成比差异有显著性。提示浸润型肝癌大鼠实验组与对照组清扫淋巴结直径构成比不同。实验组清扫淋巴结近距离组162枚,占35.29%;中距离组210枚,占45.75%;远距离组87枚,占18.95%。对照组清扫淋巴结近距离组103枚,占33.44%;中距离组139枚,占45.13%;远距离组66枚,占21.43%。经χ2检验,p>0.05,清扫淋巴结位置构成比差异无显著性。提示浸润型肝癌大鼠实验组与对照组清扫淋巴结位置构成比无差别。结论:实验结果表明在大鼠肝癌模型手术中应用纳米炭注射液对肝癌及淋巴引流示踪具有明显作用,能够增加肿瘤切缘的可视性,避免传统手术中切缘判断的盲目性,能有效降低切缘肿瘤细胞阳性率。纳米炭混射液能使肿瘤区域引流淋巴结出现黑染,使手术中淋巴结清扫呈现可视性,目的性加强,降低手术清扫的复杂性和危险性,在传统手术的基础上更彻底、迅速、安全地清扫淋巴结。对降低肝癌术后复发率和转移率具有积极意义。