【摘 要】
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目的：1.观察小鼠角膜上皮缺损与角膜新生血管发生发展的关系
2.初步探讨新生血管发生发展过程中VEGF与sFlt-1含量的变化趋势方法正常成年雄性KM小鼠分别接受角膜缘损伤加
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目的：1.观察小鼠角膜上皮缺损与角膜新生血管发生发展的关系
2.初步探讨新生血管发生发展过程中VEGF与sFlt-1含量的变化趋势方法正常成年雄性KM小鼠分别接受角膜缘损伤加角膜上皮刮除、单纯上皮刮除两种干预方法,分别于干预后1d,3d,5d,7d,10d,14d内取下实验眼角膜,行HE切片明确上皮修复及炎症细胞浸润情况,PAS染色以检测有无杯状细胞,角膜铺片行免疫荧光标记血管以评估血管面积,同时以非变性蛋白印迹法半定量分析各时间点VEGF结合态和游离态蛋白含量,以实时定量逆转录多聚酶链反应分析对应时间点的sFlt-1 mRNA表达强度。
结果：两实验组均成功诱导了角膜新生血管。除第14d外,角膜缘损伤加角膜上皮刮除组(Ⅰ组)各时间点新生血管面积均高于单纯上皮刮除组(Ⅱ组),差异具统计学意义。Ⅰ组5d时上皮方接近结构上的修复完全,而Ⅱ组于1d时上皮即修复完整。Ⅰ组早期的炎症细胞浸润程度高于Ⅱ组,但中后期二组间无明显差异。Ⅰ组10d及14d时均出现角膜上皮层内杯状细胞,密度自角膜缘向角膜中央递减。蛋白测定显示VEGF蛋白存在结合态及游离态二种形式,Ⅰ组各时间点VEGF总蛋白及游离蛋白含量均高于Ⅱ组。sFlt-1 mRNA表达强度表现有上下波动,呈“W”形曲线。
结论：1.角膜缘损伤通过影响上皮修复的质和量,造成持续性的上皮缺损,相对减少sFlt-1的表达,游离VEGF含量增加,促进血管生成。
2.在上皮缺损诱导的角膜新生血管模型中,sFlf-1的表达受上皮修复及炎症诱导等因素影响,表现为近似“W”形的曲线。
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