【摘 要】
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该项研究根据上前端粒酶研究的深入发展和应用的需要,依据端粒酶能够以自身RNA为模板在特异性引物存在下合成端粒DNA顺序的特性,结合选择性产物沉淀手段和放射性掺入的高灵敏
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该项研究根据上前端粒酶研究的深入发展和应用的需要,依据端粒酶能够以自身RNA为模板在特异性引物存在下合成端粒DNA顺序的特性,结合选择性产物沉淀手段和放射性掺入的高灵敏性,经过长期的摸索建立了端粒酶活性定量分析方法,对可能影响分析结果的某些因素做了初步探讨.该方法的基本原理是:以端粒DNA富G链顺序为引物,在合适的反应条件下,端粒酶在延长富G链3端时,将<3>H标记的核苷酸掺入合成产物中,然后经过适当的分离步骤,除去未掺入的游离<3>H-dTTP,用液体闪烁计数器测定 的放射性计数(radioactive count per minute,rcpm),由此推算端粒酶活性.为了验证该方法的实用性,用该方法分析了46例临床组织细胞样品和38例胚胎组织样品的端粒酶活性水平.
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