【摘 要】
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该论文研究的是福建产蕲蛇粗毒尝试着用嗜硫色谱进行分离后,其洗脱峰在室温下放置一个晚上后,发生降解现象的原因,并对发生降解的蛋白组进行纯化和表征.蕲蛇粗毒用嗜色谱分离
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该论文研究的是福建产蕲蛇粗毒尝试着用嗜硫色谱进行分离后,其洗脱峰在室温下放置一个晚上后,发生降解现象的原因,并对发生降解的蛋白组进行纯化和表征.蕲蛇粗毒用嗜色谱分离所得的洗脱峰,在室温下放置一个晚上后,经SDS-PAGE检测发现其组分中分子量44kDa左右的蛋白质发生了降解,新生成分子量29kDa左右的蛋白质.为弄清这一现象的产生原因,将嗜硫色谱洗脱峰通过POROS 20HQ离子交换色谱进一步分离,获得5个分子量非常接近的组分.PAGE电泳结果表明,其中第五个组分(HQ-5)会发生降解.经SDS-PAGE电泳和CLC鉴定,为纯组分.由此可断定嗜硫色谱洗脱峰的降解现象是由HQ-5的自降解引起的.HQ-5经SDS-PAGE电泳测得分子量为47.6kDa,含有链内二硫键,加DTT处理后,分子量为50.8kDa.HQ-5完全降解的最快条件为:在70℃和pH9.0条件下保温80分钟.此组分具有碱性蛋白酶活性,最佳反应pH约为9.5,不耐高温,EDTA能抑制其蛋白酶活性,是一种金属蛋白酶.此外该组分还具有抗凝血活性,且能耐受较高温度.该组分是一种糖蛋白,中性糖含量为3.5﹪.
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