抗艾滋病药物分子印迹聚合物微米微球的合成与应用研究

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本文以抗艾滋病药物恩曲他滨(FTC)和齐多夫定(AZT)为模板,利用沉淀聚合法合成了分子印迹微米微球(MIPMs)。然后把合成的MIPMs作为高效液相色谱的固定相和固相萃取的吸附剂应用于人体血清样品中目标物的分离富集和检测。论文的主要研究内容如下:  (1)以甲基丙烯酸(MAA)为功能单体,二乙烯苯(DVB)为交联剂,偶氮二异丁腈(AIBN)为引发剂,乙腈为溶剂,采用沉淀聚合法初步探讨了一些影响合成非印迹聚合物微米微球(NIPMs)粒径大小的因素,通过透射电镜(TEM)对合成的聚合物进行形貌表征,探索出合成NIPMs的初步条件,在聚合温度为60℃,功能单体与交联剂的摩尔比为1:5,乙腈用量为30mL,引发剂为32mg时,合成的聚合物微球在2-3μm。在此基础上进一步来研究以抗艾滋病药物为模板分子的分子印迹聚合物微米微球的合成与应用。  (2)以FTC为模板,MAA为功能单体,探讨了FTC的MIPMs的合成条件。在优化后的最佳条件下合成的聚合物微球大小为3-5μm。将此MIPMs作为色谱柱填料,考察了此MIPMs对FTC及其相似药物的选择性能,在色谱柱的评价实验中得到的印迹因子为2.26。同时将其作为固相萃取柱的填料,对装载液、清洗液和洗脱液的组成等进行了优化,并用来分离富集人体血清样品中的FTC。实验结果表明,血清样品经过固相萃取处理,其杂质干扰基本消除,得到的平均回收收率为92.5%,RSD为3.6%(n=3),最低检出限为0.005μg/mL,该方法选择性好、准确度和灵敏度高,而且经济实用,能满足人体血清和其他生物样品中FTC的检测,有望在临床药物检测中得到应用。  (3)以AZT为模板,探讨了用MAA和AM两种功能单体来合成AZT的MIPMs的条件。在优化后的最佳条件下用两种功能单体合成的MIPMs大小均在3-5μm。用色谱表征来进一步评价用两种功能单体合成的MIPMs的印迹效果,实验表明,用AM作为功能单体合成的MIPMs的印迹因子较高为1.20,把在此条件下合成的MIPMs作为高效液相色谱的固定相进行人体血清样品中齐多夫定的分析检测。该检测方法操作简便,回收率高,有很好的精密性、重复性和稳定性,其线性范围为0.5~10μg/mL,R=0.9999,最低检出限为0.1μg/mL,能够满足药物血浆代谢的峰浓度检测,同时通过浓缩样品提高了检测的灵敏度,而且合成的聚合物微球具有选择性高,耐高温高压,耐酸碱等特性,其作为填料填充的色谱柱经济实用,不易流失。
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