【摘 要】
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本研究表明菌株BL-1和菌株BL-3能够产生抑制多种植物病原真菌、革兰氏阴性菌和革兰氏阳性菌的抗菌物质。 根据菌株BL-1、BL-3的形态特征、生理生化特性以及16SrDNA基因序
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本研究表明菌株BL-1和菌株BL-3能够产生抑制多种植物病原真菌、革兰氏阴性菌和革兰氏阳性菌的抗菌物质。 根据菌株BL-1、BL-3的形态特征、生理生化特性以及16SrDNA基因序列的分析，将菌株BL-1、菌株BL-3鉴定为侧孢芽孢杆菌。但是对抑菌谱的测定表明菌株BL-1的抑菌能力优于菌株BL-3，因此对菌株BL-1的抗菌物质进行深入的研究。 对菌株BL-1产生抗菌物质发酵条件的研究结果表明，培养基的最优组合为A2B2C1D4，配方为：可溶性淀粉3g／L（A2）、蛋白胨4g／L（B2）、牛肉膏1g／L（C1）、NaCl5g／L（D4）。其他发酵条件为：微量元素为FeSO40.02g／L、MgSO40.04g／L，初始pH7.0-8.0，装液量为50mL／250mL，接种量为4％，30℃，180rpm震荡培养72h。 对菌株BL-1发酵液中抗菌物质初步分析结果表明，酶处理和热处理后其拮抗活性大大降低，初步判断该抗菌物质为蛋白类。采用50％-90％硫酸铵盐析法，将菌株BL-1发酵液中的粗蛋白沉淀出来。透析后的粗提蛋白经过CM-Sepharose Fast Flow离子交换层析、Sephadex G-50柱层析，Sephadex G-25柱层析，共获得4个样品峰，其中2个蛋白质纯品，分子量分别为72K、56K； HPLC检测两种样品纯度达到了94.017％和90.008％。发酵液中A组分和B组分的蛋白产率分别为44.46mg／L和40.001mg／L。抗菌蛋白的颜色反应结果表明，两者均不含有精氨酸、单酚、双酚及吲哚衍生物；但含有芳香族氨基酸。
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