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本文通过DNA条形码鉴别对尖海龙、拟海龙、刁海龙、粗吻海龙和宝珈海龙进行DNA的提取、序列的PCR扩增和数据拼接与测定，分析海龙类药材种内及种间变异，建立海龙样品的主导单倍体序列，基于COI序列构建的海龙及其混伪品的邻接(NJ)树，建立统一的海龙类药材COI序列的分子鉴定方法。 本文对尖海龙进行了石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇、水极性组分的提取，同时通过闪式取提器提取海龙的蛋白质溶液，并经超滤技术分离为蛋白质总体部位、大于10kDa、3-10kDa、1-3kDa和小于1kDa的寡肽组分，共10个组分。以羟基自由基清除活性、RAW264.7增殖活性、睾丸间质细胞的增殖活性和睾酮分泌量作为壮阳生精活性的筛选指标进行筛选，上述10个不同组分均有一定的壮阳生精活性，但其中小于1KDa寡肽组分的活性明显高于其他组分，因此确定海龙＜1KDa寡肽为壮阳生精活性组分。 本文以羟基自由基清除活性、RAW264.7细胞增殖活性、小鼠睾丸间质细胞增殖活性为评价指标，在炮制温度、时间2个因素进行单因素实验确定海龙炮制的最佳炮制工艺为190℃、25min;并对炮制前后海龙寡肽的壮阳生精活性和寡肽含量进行对比研究，运用灰色关联度分析与偏最小二乘分析统计方法分别分析海龙寡肽高效液相指纹图谱和氨基酸指纹图谱与睾丸间质细胞睾酮分泌量活性药效之间的谱效相关性。 本论文以海龙生品大于10KDa组分作为底物，进行6种蛋白酶的筛选，得到海龙的最适酶为碱性蛋白酶，以小鼠睾丸间质细胞增殖活性、RAW254.7细胞增殖活性和羟基自由基清除活性为指标考察，进行碱性蛋白酶的酶解时间、温度、PH值、酶底比的单因素和正交考察实验，确定最佳酶解工艺为酶解时间为7h、酶解温度为60℃、酶解PH值为9.0、酶底比为6％。对生品天然寡肽和酶解寡肽的上述活性进行比较，研究结果表明海龙生品寡肽的活性均高于酶解寡肽，但是海龙酶解寡肽的含量远远高于生品寡肽，为海龙开发应用提供可靠依据。 利用1H-NMR技术平台结合多元统计分析对细胞代谢的动态变化进行研究海龙＜1KD组分对TM3细胞增殖活性的作用机制，揭示给药后TM3细胞的内源性代谢物变化情况，结合OPLS-DA分析差异代谢物，经Metaboanalyst分析，主要涉及丙氨酸、天冬氨酸和谷氨酸代谢，D-谷氨酰胺和D-谷氨酸代谢，丙酮酸代谢等几条能量代谢及氨基酸代谢途径。研究结果表明海龙＜1KD组分主要通过影响多种能量及氨基酸代谢等代谢对TM3细胞产生增殖作用。 综上所述，本文基于COI序列建立了统一的海龙类药材的分子鉴定方法，为海龙类药材的真伪鉴定提供可靠的依据。确定了海龙的壮阳生精活性部位;明确了海龙的炮制工艺，对海龙生品和炮制品的活性物质进行研究为炮制的规范化应用提供科学依据。并确定了海龙的酶解工艺，得到海龙的酶解寡肽为海龙天然寡肽收率较低的问题提供解决的方法。并且利用1H NMR技术平台结合多元统计分析对进行研究海龙＜1KD组分对TM3细胞增殖活性的作用机制对细胞代谢的动态变化对初步明确了海龙寡肽壮阳生精的分子作用机制。