奶牛新孢子虫病流行病学调查及病原的分离鉴定

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奶牛新孢子虫病是由Neospora caninum引起的多种家畜共患的一种原虫病.该病对牛的危害尤其严重,主要造成孕畜流产、死胎以及新生儿的运动神经系统疾病.目前新孢子虫病的研究已成为国外兽医寄生虫学界的热点问题,在中国对该领域的研究刚刚起步.该研究采集自北京地区的94份奶牛血清样本和河北地区的55份奶牛血清样本,前者用酶联免疫吸附试验(ELISA)和间接荧光抗体试验(IFAT)检测N.caninum血清抗体,后者用ELISA进行血清抗体检测.结果发现,北京地区奶牛N.caninum抗体阳性率为18.1﹪,河北地区奶牛N.caninum抗体阳性率为23.6﹪;N.caninum抗体阳性血清样本T.gondii抗体检测的结果为阴性.采用牛奶记录体系(DHI)对北京地区17头N.caninum血清抗体阳性牛进行了日产奶量、乳中蛋白率和乳脂率的测定.结果表明,N.caninum血清抗体阳性牛日产奶量比阴性牛降低9.7﹪,乳中蛋白率和乳脂率分别降低20﹪和15.4﹪.初步证明N.caninum血清抗体阳性奶牛产奶量及奶品质下降.无菌采取N.caninum血清抗体阳性牛的流产胎牛的脑组织,经腹腔接种免疫抑制的BALB/c小鼠,在156天内经4次传代,在接种小鼠的脑组织中获得新孢子虫样原虫.对小鼠体内分离获得N.caninum速殖子样虫体用ELISA和IFAT法进行了鉴定.提取虫体可溶性蛋白进行ELISA鉴定,结果呈现N.caninum阳性反应;进行IFAT试验虫体产生了强烈的荧光,而T.gondii阳性血清与虫体不反应.经血清学检测证明了该原虫为N.caninum.进行感染小鼠组织学检查,在脑组织、肾脏、肝脏、心肌均有病变,在肝脏、肾脏和心肌发现N.caninum虫体寄生.将虫体保存于液氮中,待其复苏后接种小鼠,观察虫体活性,结果观察到虫体在含50﹪血清的冻存液中保存良好,复苏后仍具感染性,虫体在液氮中的保存时间尚待进一步研究.
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