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植物内生真菌与宿主间存在复杂的信息交流和相互作用,能够帮助宿主抵御环境的胁迫,促进宿主对养分的吸收,其次级代谢产物在农业、工业及医学等领域有广泛应用。艾纳香(Blumea balsamifera(L.)DC.)作为传统抗菌黎药,在海南黎族、苗族有着悠久的用药历史,目前关于艾纳香内生真菌方面鲜有报道,本文主要研究以下三方面问题:1)比较不同生境下艾纳香内生真菌多样性,2)分离并鉴定艾纳香内生真菌,筛选具有生物活性的生防菌株,3)对其次级代谢产物进行研究从而获得结构新颖,生物活性良好的化合物。以期为艾纳香内生真菌资源的开发利用提供依据。1、利用扩增子测序技术,对种植在橡胶林下和自然条件下的艾纳香叶片内生真菌群落组成和多样性进行分析,结果表明,2种生境下艾纳香叶片内生真菌多样性和优势菌属均存在明显差异性,林下种植的艾纳香叶片内生真菌多样性相对较单一。群落组成分析结果显示,林下种植的艾纳香叶片中优势菌属为球孢菌科Teratosphaeriaceae中未定属,相对丰度为50.29%,而自然条件下生长的艾纳香叶片中的优势菌属为Pseudocercospora和球孢菌科Teratosphaeriaceae中未定属,相对丰度分别为24.18%和19.19%。2、采用传统水琼脂培养法分离培养两种生境下艾纳香内生真菌,共获得58株艾纳香内生真菌,经分子生物学鉴定,分属于24个属。抗炭疽菌试验结果显示,分离自橡胶林下的艾纳香内生真菌对四株炭疽菌的抑制作用明显强于自然条件下分离得到的艾纳香内生真菌,其中源于橡胶林下的Talaromyces和Penicillium属内生真菌对炭疽病原真菌具有显著抑制活性。抗细菌试验结果显示,源自自然条件下的Fusarium和Diapothe属艾纳香内生真菌对四种病原细菌表现出较好抑制活性。3、对筛选出的三株内生真菌(Clonostachys rosea来自胶林下,Xylariaceae sp.和Chaetothyriales sp.来自自然条件下)进行了次生代谢产物研究,共获得并鉴定出19个化合物。其中从Clonostachys rosea中分离出6个单体化合物,分别为:Verticillin A(1)、(S)-(+)-fusarinolic acid(2)、8-hydroxyfusaric acid(3)、cerebroside C(4)、3-Maleimide-5-oxime(5)和bionectriol A(6),化合物1、4、6对铜绿假单胞菌、枯草芽孢杆菌以及金黄色葡萄球菌均表现出很强的抑制作用,其中化合物6对3株供试细菌的MIC值均达到2μg/m L,显著强于阳性对照链霉素的活性,对大肠埃希菌表现较弱的抑制活性MIC值为16μg/m L,化合物1对铜绿假单胞菌的MIC值也达到2μg/m L。从Hypoxylon monticulosum分离获得5个化合物,分别为:Xylariacin A(7)、Xylariacin B(8)、Xylariacin C(9)、Xylariacin D(10)、Xylariacin E(11),均为新化合物,体外抗菌活性实验显示此类化合物对铜绿假单胞菌、枯草芽孢杆菌、大肠埃希菌以及金黄色葡萄球菌均无抑制作用。从菌株Chaetothyriales sp.中分离并鉴定了8个化合物,其中新化合物5个(包括新骨架3个),分别为:Chaetothytone A(12)、Chaetothytone B(13)、Chaetothytone C(14)、Chaetothytone D(15)、Chaetothytone E(16)、4,6-dimethylcurvulinic acid(17)、5-hydroxy-2-hydroxymethyl-4H-pyran-4-one(18)、7-epiaustdiol(19)。