基于重要阴、阳离子的荧光检测传感器合成、性质及生物学应用研究

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荧光探针具有专一性强、灵敏度高、操作方便快捷、响应时间短等优点,在分析化学、医学、环境科学和生物化学等相关领域都有广泛应用,并且近年来成为新的研究热点。文中设计合成了一个新的基于香豆素的衍生化合物1。经实验研究发现1能高效专一识别Pi,是一个由“关-开”的反应型荧光探针。在DMSO/HEPES (0.02M, pH=7.4)(V/V=9:l)溶液中加入Pi后,化合物1的溶液由无色变为浅蓝色,荧光强度增强了780倍,能够肉眼看到很明显的蓝色荧光。化合物1成功应用于活体细胞和线虫的荧光染色并完成酶的操作。首先用ATP处理Hela细胞和线虫,再用ATP水解酶处理后荧光呈像可以看到细胞和线虫明显的荧光变化。通过在Sf9细胞中加载Inx2、 Inx3病毒后检测Pi可以看到明显的荧光强度变化。这充分说明化合物1是一个高选择性识别Pi的比色和荧光化学传感器,并通过Hela细胞和线虫检测阴离子Pi,同时也阐述了Inx3病毒导致Sf9细胞通道关闭的机制。设计合成了一个新的基于罗丹明的衍生化合物2。在乙醇:水(V/V=6:4)溶液中加入Fe3+后,化合物2的溶液由无色变为粉红色,并伴随有很强的绿色荧光,而加入其它阳离子后则没有明显变化(除了Hg2+有微弱影响)。化合物2成功应用于活体细胞和线虫的荧光染色和微核实验。在BEAS-2B和Hela细胞中,细胞质和细胞核被2-Fe3+染色后呈现不同强度的荧光;通过对秀丽隐杆线虫活体荧光滴定,可以看到化合物2与不同浓度的Fe3+结合后荧光强度变化及分布。此外通过检测化合物2的细胞毒性发现化合物2对HaCaT细胞毒性非常小。这说明化合物2是一种高效、专一识别Fe3+的化学传感器。
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