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嗜热性是一种原始生命的特性,微生物作为地球上最早形成的第一类生命体,对高温的适应能力尤为惊人。与此同时,来源于高温微生物的高温酶,作为一种具有良好温度稳定性的新型酶类,它们在食品、化学、制药、造纸、纸浆和废水处理等工业中都具有广泛的应用潜能。本文通过对在云南热泉中采集的样品进行分离鉴定,并对这些菌产生的重要高温酶进行了研究,取得以下主要结果:
1、从云南腾冲、大理洱源热泉共分离、纯化得到了32株不同嗜热程度的嗜热细菌,并扩增了其中18株细菌的16SrRNA基因,通过聚类分析对这些菌株进行了鉴定,共鉴定出8个已知种(Bacillushalodurans,Anoxybacilluskamchatkensis,Anoxybacilluspushchinoensis,Anoxybacillusflavithermus,Geobacillusuzenensis,Geobacilluskaustophilus,Geobacillusstearothermophilus和Geobacillusthermoleovorans)和两个疑似新种。
2、通过系统的多相分类学研究,对两个疑似新种进行了仔细分析,最终鉴定为两个嗜热细菌新种,命名为Anoxybacillustengchongensissp.nov.和Anoxybacilluseryuansissp.nov.。
3、采用酶的筛选培养基,对两株细菌新种发酵产物进行活性测定,发现两株菌均存在蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶活性,并对两株菌的脂肪酶的酶学性质进行了研究。
4、对32株高温细菌和实验室保存的高温真菌进行了高温酶的筛选,获得一株淀粉酶活较高的菌株YM1-4,通过ITS序列扩增分析,该菌株鉴定为Talaromycesthermophilus,通过液相层析技术对该菌株产生的高温淀粉酶进行了纯化。