莲子皮渣中酚类物质及其抗氧化活性研究

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本文以莲子加工副产物一莲子皮渣为实验材料,优化莲子皮渣中酚类物质提取工艺,测定莲子皮渣提取物中总酚、总黄酮、总原花色素含量,研究其抗氧化活性及α-葡萄糖苷酶抑制活性,并通过UPLC-Triple-TOF/MS技术分离鉴定莲子皮渣中生物活性成分,旨在为莲子皮渣资源的高值化利用提供理论基础。主要研究结果如下:(1)通过响应面Box-Behnken设计方法优化得到莲子皮渣酚类物质超声辅助萃取的最佳工艺条件。在单因素试验结果基础上,选择70%丙酮为提取溶剂,通过响应面设计优化得到最佳工艺条件:料液比1:25.49 g/mL,提取时间1.58 h,提取温度49.90℃。该条件下,得到总酚、总原花色素、DPPH+清除能力三响应值预测结果分别为:194.31 mg GAE/gDW,242.99 mg CE/gDW,238.60 mg AAE/gDW,实际验证值与预测值相符,模型可信度为98.3%。(2)在响应面优化最佳工艺条件基础上,研究三种不同溶剂对里叶白莲、十里荷花、建莲的莲子皮渣中各类别酚类物质含量的影响。结果表明,同品种莲子皮渣不同溶剂提取物中各类别酚类物质含量大小顺序:70%丙酮>70%甲醇≥70%乙醇。3个品种莲子皮渣70%丙酮提取物的总酚含量在105.64~194.54mgGAE/gDW之间;总黄酮含量在40.59~78.72mgCE/gDW之间;总原花色素含量在 136.88~243.15mgCE/gDW之间。里叶白莲莲子皮渣中各类别酚类物质含量显著高于十里荷花和建莲莲子皮渣中对应酚类物质含量。(3)测定3个品种莲子皮渣不同溶剂提取物的抗氧化活性。同品种莲子皮渣不同溶剂提取物抗氧化活性高低顺序:70%丙酮>70%甲醇≥70%乙醇。3个品种莲子皮渣70%丙酮提取物的DPPH+清除能力在117.68~238.53 mg AAE/g DW之间,ABTS-+清除能力在2802.04~7973.18 mg AAE/g DW之间,FRAP铁离子还原能力在81.72~223.85 mg AAE/gDW之间。里叶白莲莲子皮渣提取物抗氧化活性显著高于十里荷花、建莲莲子皮渣提取物抗氧化活性。(4)评价3个品种莲子皮渣不同溶剂提取物的α-葡萄糖苷酶抑制活性。3个品种莲子皮渣70%丙酮提取物的IC50在5.73~6.69αg/mL之间,70%甲醇提取物IC50在7.83~13.38 μg/mL之间,70%乙醇提取物IC50在9.29~17.30αg/mL之间,阳性对照阿卡波糖IC50为1293.31 μg/mL。结果表明莲子皮渣70%甲醇、70%乙醇、70%丙酮提取物均具有极高的α-葡萄糖苷酶抑制活性,其中70%丙酮提取物抑制活性最高。(5)借助UPLC-Triple-TOF/MS技术从莲子皮渣中分离鉴定30种生物活性成分,包括6种酚酸(没食子酸、新绿原酸、邻苯二酚、鞣花酸、咖啡酸、对香豆酸),9种黄酮醇(槲皮素、异鼠李素、山奈酚、芦丁、金丝桃苷、异槲皮苷、槲皮素-7-0-葡萄糖醛酸苷、山奈酚-3-O-葡萄糖苷、杨梅素-3-O-葡萄糖醛酸苷),3种黄烷醇(儿茶素、表儿茶素、(表)棓儿茶素),8种原花色素(4种原花色素二聚体、3种原花色素三聚体、1种原花色素四聚体)和4种不饱和脂肪酸。
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