细胞钙超载模型的建立及在中药钙拮抗药效评价中的应用

• 作 者: 肖桂凤
• 发表日期: 2005年期
• 关键词: 钙超载模型 胞浆游离钙 激光扫描共聚焦显微技术 钙拮抗剂

胞浆游离钙离子浓度的异常升高称为钙超载或钙超负荷。钙超载可以引起细胞的损伤反应甚至导致细胞死亡。在心血管系统内钙超载可引起血管平滑肌细胞和内皮细胞的损伤或死亡,导致多种疾病的发生。 本论文通过选择不同的激动剂KCl、ATP、AngⅡ建立血管平滑肌细胞钙超载模型,激动剂KCl、ATP、H₂O₂建立人脐静脉内皮细胞钙超载模型,应用激光扫描共聚焦显微技术以及荧光染色技术对钙超载模型形成过程进行检测及对其结果进行定量分析。其中,KCl激活细胞膜上电压依赖型钙通道,ATP可激活细胞内质网/肌质网上IP₃受体通道,H₂O₂和Angiotensin Ⅱ（Ang Ⅱ）可同时激活细胞膜上受体通道和细胞肌质网上IP₃受体通道导致细胞钙超载。应用建立的钙超载模型分别对具有降压效果的黄芪甲甙和保护内皮细胞作用的葛根素两种药物的钙拮抗药效进行了评价,结果表明黄芪甲甙对KCl、ATP、Ang Ⅱ诱导的平滑肌细胞钙超载的抑制率分别为84.8%、47.2%和34.2%,能有效拮抗平滑肌细胞钙超载;葛根素对KCl、ATP、H₂O₂诱导的内皮细胞钙超载的抑制率分别为78.2%、56.5%和72.2%,对内皮细胞钙超载具有显著的拮抗效果。 本文建立的血管平滑肌细胞和内皮细胞钙超载模型,具有快速、稳定、易于检测的特点,可应用于中药钙拮抗药效的评价以及作用机制的研究。