利用<'19>F NMR研究大肠杆菌精氨酰-tRNA合成酶在底物诱导下的构象变化人源亮氨酰-tRNA合成酶的研究

• 作 者: 李晓化
• 机 构: 中国科学院上海生命科学研究院
• 出 处: 贵州大学
• 发表日期: 2004年期
• 关键词: 氨基酰-tRNA合成酶 氨基酰-tRNA合成酶精氨酰-tRNA合成酶 精氨酰-tRNA合成酶亮氨酰-tRNA合成酶 亮氨酰-tRNA合成酶tRNA<�

该文利用<19>F核磁共振(<19>Fluorine-Nuclear Magnetic Resonance,<19>F NMR),系统地研究4-氟-色氨酸(4-Fluoro-D,L-Tryptophan,4-F-Trp)标记的大肠杆菌(Escherichia coli,E. coli)精氨酰-tRNA合成酶(Arginyl-tRNA Synthetase,ArgRS)在底物诱导下的构象变化.当精氨酸和tRNA结合到ArgRS后,该酶的催化中心结构域和tRNA反密码茎环结合结构域发生显著的构象变化.另外,通过比较4-F-Trp标记的ArgRS突变酶的<19>F NMR谱,4-F-Trp标记的野生型ArgRS的<19>F NMR谱上的五个共振信号都一一归属到ArgRS的五个4-F-Trp残基(162、172、228、349和446).<19>F NMR实验发现,溶液状态的 E. coli ArgRS被底物诱导的局部构象变化与结晶状态的酵母ArgRS具有一定的相似性.