杀线虫活性淡水真菌的筛选及其次生代谢产物的研究

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本文以全齿复活线虫(Panagrellusredivivus)和松材线虫(Bursaphelenchusxylophilus)为靶标,分别用NHK、MEM、YPD培养基发酵60株淡水真菌,共180份样品进行毒杀线虫活性筛选。测试结果表明,Coelomycetesp.YMF1.01029、TiarosporellapaludosaYMF1.01051、PseudohalonectrialignicolaYMF1.01214和DactyosporiumheptasporumYMF1.01231等四株菌毒杀线虫活性较强。以这四株菌为出发菌株,进行扩大培养,分离、提纯和鉴定其活性代谢产物。   从淡水真菌Coelomycetesp.YMF1.01029的YPD发酵液中分离获得化合物(2R*)-2—[(1S*,4S*,5S*,8R*)-2,8-dimethy1-2,7—dioxabicyclo[3.2.1]oct—4—yl]-2-methylbutan-2—one(1),(2R*)-2—[(1R*,4S*,5R*,8S*)-2,8-dimethyl-2,7—dioxabicylco[3.2.1]oct—4—yl]-2-methylbutan-2—one(2),(4RS)—3,4—Dihydro—4,8-dihydroxynaphthalen-2(2H)—one(3),PreussomerinE(4),PalmarumycinC12(5)。其中1、2是两个新的信息素类化合物,具有新颖的双环dioxabicyclo[3.2.1]octane结构。初步的活性测试表明,化合物1、2、4、5对病原真菌和细菌有中等的拮抗活性,化合物3对所测试的病原真菌和细菌均无活性。当作用时间为48h时,化合物1、2、3、4、5对松材线虫(B.xylophilus)的半致死率(LC50)分别为153.8,135.5、406.4、192.1、177.8ppm。   从淡水真菌T.paludosaYMF1.01051的NHK发酵液中分离获得化合物3,4—dimethoxy—3,4,9—trihydroxy—7,7—epoxy—9—oicacid(6),4,5,7—trihydroxy—3,5—dimethoxyflavone(7),NeoechinulinA(8)。其中6为一新的木脂素。初步的活性测试表明,化合物6—8具有中等强度的毒杀松材线虫活性,当作用时间为48h时,对松材线虫(B.xylophilus)的半致死率(LC50)分别为135.8、253.5、103.2ppm。   从淡水真菌P.lignicolaYMF1.01214的MEM发酵液中分离获得化合物4—[2-(2-Hydroxy-2—methyl—ethoxy)—propyl]—phenol(9),1H—Indene-2-carboxylicacid(10),erythro-20—(4—methoxyphenyl)—propan-20,20—diol(11),4,5—Dihydroxy-hexanoicacid(12),4,4biphenol(13)。其中化合物9为新的羟基芳香类化合物。初步的活性测试表明,化合物9-23具有一定的毒杀松材线虫活性,当作用时间为48h时,化合物9、10、11、12、13对松材线虫(B。xylophilus)的半致死率(LC50)分别为130.9、178.5、109.8、122.9、282.4ppm。   从淡水真菌D.heptasporumYMF1.01231的NHK发酵液中分离获得化合物XestodecalactoneA(14),XestodecalactoneB(15),XestodecalactoneC(16)。化合物14-26是自然界中比较罕见的间苯酚大环内酯类型化合物,仅被报道过一次。经活性测定表明,三个化合物具有较强的毒杀线虫活性。当作用时间为48h时,化合物14、15、16对松材线虫(B.xylophilus),全齿复活线虫(P.redivivus)和秀丽隐杆线虫(C.elegans)的半致死率(LC50)分别为61.1、68.7、111.3ppm;81.4、63.0、105.1ppm;97.2、74.6、85.8ppm。
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