按大肠杆菌高表达序列设计合成和克隆人干扰素a-2b基因

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根据基因编码区中同义密码子的非均匀使用,编码区中碱基垢构成及密码子内和密码子之间的碱基关联与基因表达水平之间的关系,利用密码子的简并性将人干扰素a-2b基因编码区进行重新设计,使之成为预期可在大肠杆菌中高效表达的外源基因.应用化学合成法,合成寡核苷酸小片段,然后组装成完整的人干扰素a-2b基因片段,并克隆在pUC19质粒中, 经序列分析证实,合成并克隆的人干扰素a-2b基因序列与设计完全相符.同时构建了表达质粒pBV220/IFNa-2b,经酶切分析与PCR分析,证实构建正确.
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