聚合离子液体包覆硅胶纳米材料在蛋白质分离中的应用

• 作 者: 韩路
• 出 处: 东北大学
• 发表日期: 2013年01期
• 关键词: 聚合离子液体 纳米硅胶 卵清蛋白 固相萃取

聚合离子液体(PILs)是一种新兴的高分子材料,本论文将聚合离子液体固定在纳米硅胶颗粒表面,并用于蛋白质的分离纯化,拓展了聚合离子液体在生命科学中的应用。采用γ-(异丁烯酰氧)丙基三甲氧基硅烷为硅烷化试剂对纳米硅胶颗粒表面进行修饰,引入可聚合的末端双键。通过离子液体单体(1-乙烯基-3-乙基咪唑溴代盐)和交联剂(1,4-丁基-3,3’-二-1-乙烯基咪唑二溴代盐)的共聚反应,得到聚(1-乙烯基-3-乙基咪唑溴代盐)共价包覆的纳米复合材料PIL@SiO2。对PIL@SiO2复合材料进行紫外-可见光谱(UV-Vis)、透射电镜(TEM)、扫描电镜(SEM)、Zeta电位等表征。以PIL@SiO2复合材料作为固相萃取剂,考察了其在蛋白质分离纯化中的性能。结果表明,PIL@SiO2对酸性蛋白具有明显的选择性。本实验以卵清蛋白的分离纯化为评价指标,通过改变聚合过程中离子液体单体的用量,在pH 6.0时,5.0 mg PIL@SiO2复合材料对1 mL 200 μg mL-1卵清蛋白的最大吸附效率为95%。卵清蛋白在复合材料表面的吸附行为符合Langmuir模型,最大吸附容量为333.3 mg g-1。吸附在固相材料表面的卵清蛋白可用0.2%(m/v)的SDS溶液进行洗脱,洗脱回收率为60%。圆二色光谱表明经透析除去SDS后,卵清蛋白的二级结构不发生改变。将所建立的方法用于鸡蛋白中卵清蛋白的选择性分离,并采用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳进行纯度验证,结果表明经该方法分离得到的卵清蛋白具有较高纯度。