穿支蒂筋膜皮瓣蒂部组织量对皮瓣存活影响的实验研究

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背景皮瓣移植术为皮肤软组织缺损修复的常见方法,因其具携带组织量充足,对深部组织缺损外露、局部营养状态不佳创面及器官再造方面有较好的使用价值。临床使用中,皮瓣的存活率为其主要限制因素,在各类皮瓣存活率实验研究中,蒂部血管直径及灌注压影响因素被大部分学者认可。但是,对于皮瓣蒂部含血管在内的筋膜组织量体积,对皮瓣存活率及临床应用的影响鲜少提及。本课题通过选择穿出点恒定且有对称分布特点的猪腹壁上动脉穿支(DSEAP deep superior epigastric artery perforator)为目标血管建立动物实验模型,尝试基于解剖学、血流动力学、组织学检查及免疫荧光染色等实验数据结论来解答该问题。目的①论证小型猪皮肤解剖结构及血供特点与人类的相似性,建立与人类皮瓣结构相似的动物模型。②比较保留不同皮瓣蒂部筋膜组织量,对相同蒂部血管口径下局部穿支蒂皮瓣成活及灵活度的影响。方法①取清洁级小型猪1只,应用小猪尸体解剖对小猪腹部结构进行研究,记录腹壁血管的走行等基本信息,与人类皮肤组织结构及血管构建对比。②取清洁级小型猪10只,于小猪腹壁预制以DSEAP为蒂,底边为3.5cm,两腰围为8cm的V形皮瓣,随机分为4组。保留穿支血管组(A组)、保留穿支及蒂部筋膜组织直径共约1cm2组(B组)、保留穿支及蒂部筋膜组织直径共约2cm2组(C组)、保留穿支及蒂部筋膜组织直径共约3cm2组(D组),每组10个皮瓣,共40个。术前多普勒超声测量DSEAP血管直径及平均血流速度;观察各组皮瓣术中旋转度、可推进距离,术后荧光染色范围、皮瓣存活率,综合测评各组皮瓣中最优方案;检测40例皮瓣组织标本新生血管及胶原含量变化,分析组间微血管密度(MVD)的改变;应用内皮粘蛋白endomucin免疫荧光染色于激光共聚焦显微镜下,观察4组皮瓣间新生血管形成和血管内皮生长因子(Vascular endothelial growth factor,VEGF)表达的差异。结果①小型猪腹部皮肤及皮下解剖层次与血管分布规律与人类下腹部相似。②各组皮瓣蒂部穿支血管直径及血液流速差异均无统计学意义(p>0.05)。比较A~D组活动度、推进距离与术后14d皮瓣存活率,C组综合测评最优。术后即刻D组皮瓣荧光染色(97%)>C组皮瓣荧光染色(78%)>B组皮瓣荧光染色(61%)>A组皮瓣荧光染色(52%);HE、胶原染色及免疫荧光染色可见各组间细胞及胶原变化,术后 7d 新生血管 MVD 值 D 组(8.20±1.095)>C 组(7.60±1.949)>B 组(5.40±1.14)>A组(1.00±0.70),组间差异有统计学意义(P<0.05),术后14d新生血管MVD值D组(13.20±0.45)>C组(13.00±0.71)>B组(12.20±1.09)>A组(8.40±1.817),组间差异有统计学意义(P<0.05),但C、D组比较差异无统计学意义(P>0.05)。endomucin及VEGF表达与皮瓣存活率有正相关性。结论①小型猪有着和人类腹部解剖结构相似,可用来建立皮瓣研究模型。②穿支筋膜皮瓣蒂部含穿支血管筋膜组织面积为2cm2(C组),即占皮瓣总面积1/3时,皮瓣成活率高且对创面的缺损修复范围限制小。
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