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目的:探讨能使兔耳缘静脉硬化治疗后静脉闭塞而不引起耳缘静脉周围组织损伤的平阳霉素的浓度。 方法:实验动物:30只成年新西兰大白兔。60只兔耳随机分成6组,每组10只耳。分别为A组、B组、C组、D组、E组和F组。A组(n=10):耳缘静脉注射生理盐水0.3ml;B组(n=10):耳缘静脉注射1mg/ml平阳霉素0.3ml;C组(n=10):耳缘静脉注射2mg/ml平阳霉素0.3ml;D组(n=10):耳缘静脉注射3mg/ml平阳霉素0.3ml;E组(n=10):耳缘静脉注射4mg/ml平阳霉素0.3ml;F组(n=10):耳缘静脉注射6mg/ml平阳霉素0.3ml。在注射后第2天、7天、14天、21天观察耳缘静脉的肉眼下的变化和光镜、透射电镜下的形态学变化;用免疫组织化学的方法定性检测caspase-3的变化。选取第七天的标本,每张切片取3个高倍镜视野,计算出管壁及其周围组织 caspase-3阳性率的平均值,用(x?s)%表示,应用SAS8.0统计软件进行单因素的方差分析和配对t检验。 结果:不同浓度的PYM作用兔耳缘静脉后,肉眼下观察:第2天见耳缘静脉及其周围红肿。第7天时见红肿现象明显减轻。A组、B组和C组未见管腔的闭塞。D组、E组和F组在第14天时出现了耳缘静脉的闭塞;在第21天时可见硬化区有毛细血管长入。6mg/ml的PYM还引起耳缘静脉周围皮肤组织的破溃。光镜下观察:不同浓度的PYM均引起血管内皮细胞和平滑肌细胞的增生,在第2、7天时血管壁及血管周围组织均有炎性细胞的浸润, D组、E组和F组在第14天时可见由于增生的细胞使管腔闭塞。第21天可见毛细血管长入硬化区。透射电镜下观察:取第7天的标本进行观察,发现实验组血管内皮细胞的细胞核有染色质边集现象,线粒体肿胀并且有空泡出现。血管的平滑肌细胞的细胞核也有染色质的边集,在细胞质中发现了凋亡小体。Caspase-3阳性表达率:caspase-3在所有的标本中均可见阳性表达,在同一组中,caspase-3的表达率在第7天的表达率最高。对照组表达率极低,B组、C组与对照组caspase-3表达率比较,它们与对照组没有明显的差异,p>0.05。D组、E组、F组的caspase-3的表达率与对照组比较,p均小于0.05,有明显的差异。各组间的caspase-3表达率的比较,可见A组、B组、C组之间没有明显的差异,D组、E组、F组之间也没有明显的差异,但是D组、E组、F组和A组、B组、C组之间比较有明显的差异。Caspase-3的表达率在血管壁和血管周围组织比较:可见 D、E组中有明显的差异血管壁的表达率高于血管壁周围组织,而F组中没有明显的差异。 结论:PYM是治疗海绵状血管瘤的有效药物,其局部注射的合适的浓度可能是3mg/ml、4mg/ml;PYM通过细胞的凋亡引起血管壁的损伤。本实验为平阳霉素治疗海绵状血管瘤提供了一定的实验基础。