斑马鱼发育调控基因DRG1和DRG2的克隆、表达谱分析及功能研究

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本文我们首先克隆了DRG1和DRG2基因的全序列,证实斑马鱼基因组也存在两个DRG同源基因。 本文通过对斑马鱼基因功能的研究可以揭示其在斑马鱼发育过程中所起的作用,方法主要有人工诱变、过量表达、反义技术等。 本文将采用过量表达和反义技术这两种方法,并结合rescue实验,来研究DRG1在斑马鱼胚胎发育的功能。将表达载体pcDNA3-DRG1或者体外转录的DRG1mRNA注射斑马鱼胚胎中,没有观察到畸形现象,表明DRG1的过量表达对斑马鱼胚胎的发育没有明显的影响。通过morpholino反义抑制技术并结合rescue实验,证实DRG1-MO确实可以抑制内源DRG1的表达,并对胚胎的发育造成了明显的影响。胚胎的尾部产生畸形,多数胚胎的尾部末端向下弯曲;胚胎的中脑和后脑之间的界线(MlHB)消失。表明DRG1是斑马鱼脑分化和尾部形成所必需的基因。
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