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背景:癫痫是一个复杂的临床综合症,极大地影响了人类的健康,因此如何防治癫痫是一个需要尽快解决的课题。现有的抗癫痫药物由于其作用机制单一等原因,不能彻底地预防和治疗癫痫。预防和治疗癫痫应从多方面干预才能达到预期效果。而银杏叶提取物(Ginkgo biloba extract, GBE)含有多种成分,可作用于多个靶点,可能更有效地防治癫痫。目的:本实验采用锂-匹罗卡品癫痫(Lithium-Pilocarpine Seizures, LPS)大鼠模型,分别经预处理和急性给药两种给药模式,通过观察GBE对致痫大鼠的行为学、脑电图(EEG)和海马结构神经元和星形胶质细胞反应性的影响来评估GBE对癫痫的干预作用,并对其可能的作用机制进行探讨。期望为癫痫的临床预防和治疗提供一种更安全有效的药物并为银杏叶制剂用于临床中难治性癫痫的预防和治疗提供实验依据和指导。方法:以健康成年雄性Sprague-Dawley白色大鼠为研究对象。所<WP=5>有药物均经腹腔注射。120只大鼠随机分成5组:即生理盐水对照组(n=6);GBE单独给药对照组(n=6);LPS组(n=36);GBE预处理组(n=36);GBE急性给药组(n=36)。后三组根据处死时间不同,再分为6个亚组:即给予匹罗卡品后3h、1d、3d、7d、14d和60d,每个亚组6只大鼠。记录各组大鼠行为学和EEG变化并对其海马组织进行Nissl染色和c-Fos蛋白免疫组化染色和胶质原纤维酸性蛋白(GFAP)免疫组化染色。结果:1.行为学:生理盐水对照组和GBE单独给药对照组均为0级;LPS组、GBE预处理组和GBE急性给药组的4级以上发作率分别为91.67%、5.56%和86.11%;死亡率分别为11.11%、0和8.33%;站立发作潜伏期分别为30.38±12.01分钟、95.00±46.67分钟和30.75±12.92分钟。与LPS组相比,GBE预处理组的4级以上发作率和发作分级的明显降低。GBE预处理的预防有效率为94.44%,GBE急性给药的治疗有效率为35.48%。2.EEG:生理盐水对照组和GBE单独给药对照组大鼠EEG正常。LPS组大鼠EEG可见频率增快和/或波幅增高,多个棘波或阵发性连续棘波群发放。绝大多数GBE预处理组大鼠EEG仅见频率增快,而无棘波发放。GBE急性给药组大鼠EEG与LPS组类似。3.病理形态学(1)Nissl染色:在给予匹罗卡品后14天和60天,与生理盐水对照组相比,LPS组大鼠海马结构CA1区、CA3区和齿状回门区的神经元数量明显减少。与LPS组相比,GBE预处理组大鼠海马结构各亚区神经元数量明显增多,而GBE急性给药组与LPS组无差别。(2)c-Fos免疫组化染色:在给予匹罗卡品后3小时,生理盐水对照组、GBE单独给药组和GBE预处理大鼠海马结构c-Fos蛋白表达阴性。LPS组和GBE急性给药组大鼠海马结构c-Fos蛋白表达阳性。(3)GFAP免疫组化染色:与生理盐水对照组相比,LPS组大鼠海马结构CA1区、CA3区和齿状回门区GFAP免疫反应(IR)阳性细胞数明显增多;GFAP-IR阳性细胞胞浆平均光密度明显降低。与LPS<WP=6>组相比,GBE预处理组和GBE急性给药组各时间点海马结构各亚区GFAP-IR阳性细胞数明显减少;GFAP-IR阳性细胞胞浆平均光密度明显增高。结论:1.LPS大鼠模型具有三个按时间顺序出现的不同的时期,具有操作简单、成功率高、易于观察、价格低廉等特点,是用于人类颞叶癫痫发病机制和抗癫痫药物研究的理想动物模型。2.GBE预处理和GBE急性给药两种给药模式均有一定的抗癫痫作用。GBE预处理给药的抗癫痫作用明显优于急性给药,提示GBE可能更适合用于预防癫痫。3.GBE对LPS的抗癫痫作用可能与GBE能防止其海马结构神经元脱失、抑制其海马结构c-Fos蛋白表达和降低其星形胶质细胞反应性有关。