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高温应激能对动物采食量、体增重和饲料效率等产生不良影响,已成为影响动物可持续生产的重要因素之一。目前,有关急性热应激对动物内分泌激素和肉品质的影响是热应激研究的焦点,而关于慢性热应激对动物生产性能的影响报道罕见。因此,本试验以快大型AA肉鸡为试验动物,探讨慢性热应激导致生产性能下降的机制及其对肉鸡肠道和肌肉脂质过氧化的作用,试图从营养调控的角度去改善慢性热应激对肉鸡产生的不良影响。本试验分为三部分: 第一部分:慢性热应激对肉鸡生长性能下降机制的探讨 试验选用540只21d健康爱拔益加(AA)肉仔鸡公雏,随机分配到6个实验处理组中,每个处理6个重复,每个重复15只鸡。实验分组如下:对照组(按照AA肉鸡推荐温度正常饲喂;23℃)、持续高温热应激组(34℃)、循环高温热应激组(10:00~16:00温度保持在36℃;16:00至第2天10:00温度保持在23℃)和循环变温营养调控组(温度同循环高温热应激组;基础日粮添加4000U/kg木聚糖酶),持续高温日粮配对组(23℃;采食量与前1天持续高温热应激组采食量一致)和循环高温日粮配对组(23℃;采食量与前1天循环高温热应激组采食量一致)。肉仔鸡采用小麦-玉米-豆粕型基础日粮饲喂,肉仔鸡经过7天的适应期,29d正式开始实验,42d结束。记录并计算29~42d各周肉鸡平均日采食量和体增重。分别在30d、32d、35d和42d上午9点,从每个重复中选取2只接近平均体重的肉仔鸡,测定其直肠温度;颈静脉采血用于测定血液生化指标;采集空肠食糜检测肠道消化酶活性;35d和42d上午9点,从每个重复中采集2只接近平均体重肉鸡的下丘脑组织,用于测定下丘脑采食相关基因的表达量。 1.结果表明当肉鸡热暴露2天后,其直肠温度、血清皮质酮含量和血糖含量显著高于对照组(P<0.05),表明热应激建模成功。当热应激组肉仔鸡处于29~35d和36~42d阶段,所试鸡的采食量、体增重比对照组肉鸡有不同程度的降低,其耗料增重比相对于对照组肉鸡有不同程度提高。当肉鸡处于42d时,持续热应激组和循环热应激组肉鸡体重显著低于对照组肉鸡18.2%(P<0.05)和7.4%(P<0.05)。相对于循环热应激组肉鸡,循环热应激调控组肉鸡生长性能获得一定的改善(P>0.05)。 2.与对照组肉鸡相比,热应激组(持续热应激组、循环热应激组和循环热应激调控组)肉鸡空肠胰蛋白酶、脂肪酶和淀粉酶酶活,均呈现出前期代偿性升高,后期降低的趋势;与对照组肉鸡相比,持续热应激组肉鸡空肠黏膜蔗糖酶具有一定程度的降低(P>0.05);而循环热应激组肉鸡空肠黏膜蔗糖酶,表现出先升后降的趋势。 3.在试验的全期,下丘脑抑采食基因POMC、CRH mRNA的表达量持续热应激组和循环热应激组肉鸡显著高于对照组肉鸡(P<0.05),并分别显著高于其日粮配对组肉鸡(P<0.05)。处于热应激或限饲的条件下,肉仔鸡下丘脑促采食基因NPY mRNA的表达量均不同程度的高于对照组(自由采食)肉鸡;下丘脑AgRP mRNA的表达量循环热应激和持续热应激组肉鸡在热应激前期(35d)均不同程度地低于其日粮配对组肉鸡,这表明高温环境是导致热应激组肉鸡促采食基因表达量降低的首要决定因素。 第二部分:慢性热应激对肉鸡肠道脂质过氧化和肠道损伤的影响 当肉鸡处于42d时,从每个重复中选取2只接近平均体重的肉鸡,屠宰后,迅速分离肠道,分别采集十二指肠、空肠和回肠的组织和黏膜,测定黏膜脂质过氧化指标和肠道紧密连接蛋白基因mRNA的表达量。结果发现,与对照组相比,热应激组(持续热应激组、循环热应激组和循环热应激调控组)肉鸡小肠ROS和MDA含量具有不同程度提高,表明热应激可导致肉仔鸡肠道产生氧化应激,并以小肠前段(十二指肠和空肠)表现尤为显著。肉鸡小肠紧密连接蛋白ZO-1和Occludin mRNA的表达量热应激组(持续热应激组、循环热应激组和循环热应激调控组)显著低于对照组肉鸡(P<0.05),而循环热应激调控组高于循环热应激组。这表明热应激可导致肉仔鸡肠道通透性增加,循环热应激调控组具有改善肉仔鸡肠道健康的作用。 第三部分:慢性热应激对骨骼肌脂质过氧化和能量代谢的影响 当肉鸡处于42d时,从每个重复中选取2只接近平均体重的肉鸡,屠宰后,迅速分离其胸肌和腿肌,测定其脂质过氧化指标、磷酸腺苷含量和avUCP、avPGC-1α和avANT mRNA的表达量。结果表明热应激可不同程度的提高肉仔鸡骨骼肌ROS和MDA含量。脂质过氧化程度持续热应激组肉鸡骨骼肌高于循环热应激组肉鸡;肉鸡骨骼肌ATP含量持续热应激组低于对照组肉鸡,ADP含量高于对照组肉鸡,暗示持续热应激对肉鸡骨骼肌能量代谢产生不利影响,持续热应激可能导致骨骼肌处于疲劳状态。与对照组相比,循环热应激组及其调控组肉鸡对磷酸腺苷和能荷值的作用不显著(P>0.05);肉鸡骨骼肌avUCP和avANT mRNA表达量热应激组(持续热应激组、循环热应激组和循环热应激调控组)显著高于对照组肉鸡(P<0.05),表明热应激能使肉鸡机体发生温和的解偶联反应,以防止ROS的过量积累造成肌肉肉质下降。骨骼肌avPGC-1α mRNA表达量热应激组与对照组肉鸡差异不显著(P>0.05)。