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目的初步了解蚕丝支架对雪旺细胞(SchwannCells,SCs)的吸附作用,观察蚕丝支架对SCs生长形态和功能的影响,期望为周围神经组织工程学方法修复神经缺损提供理论和实验依据,为口腔颌面外科的周围神经修复奠定基础。
方法从家蚕蚕茧中抽丝所得的原料蚕丝,经胰蛋白酶消化后与原料蚕丝分别制成三维支架;取新生2~5天的SD大乳鼠进行SCs的分离纯化培养及免疫荧光染色鉴定;将所培养的原代SCs与蚕丝支架复合培养;细胞计数法测定SCs在蚕丝支架上的吸附率;MTT法测定SCs在蚕丝支架上的活性,并于倒置显微镜、扫描电镜及透射电镜下观察SCs在蚕丝支架上的生长形态及功能。
结果①蚕丝三维支架上滴加SCs后,在消化后蚕丝支架上,可见SCs于1~2天完全贴壁,培养3~9天细胞分裂并生长增殖十分活跃,2周时蚕丝支架网眼充满SCs,其对SCs的吸附率为96.325%±0.127,与原料蚕丝支架有显著性差异(P<<0.01);②扫描电镜见生长在蚕丝支架上的SCs分裂迁移形成了类似Bungner带的纵向排列的细胞链,并分泌大量冰霜样基质;③透射电镜观察SCs功能活跃;④消化后蚕丝支架上的SCs用MTT法所测的细胞活性与正常培养的SCs比较差异无显著性(P>0.05)。
结论蚕丝对SCs具有良好的吸附作用,并能维持SCs的正常形态和功能,蚕丝是SCs立体培养时良好的天然支架。