【摘 要】
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环状RNA（circular RNA,circ RNA）是一类环形的RNA分子,广泛存在于各种生物体内,可以调控基因表达,对肌肉细胞的生长、增殖等有重要作用。为了探索circ RNA对家鸡生长的影响,本研究筛选并鉴定出鸡原代成肌细胞中高表达的circ ZBTB10,通过q RT-PCR检测circ ZBTB10的组织表达规律,发现circ ZBTB10在杏花鸡心、肝、肾、胸肌和腿肌多个组织中均有高
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环状RNA（circular RNA,circ RNA）是一类环形的RNA分子,广泛存在于各种生物体内,可以调控基因表达,对肌肉细胞的生长、增殖等有重要作用。为了探索circ RNA对家鸡生长的影响,本研究筛选并鉴定出鸡原代成肌细胞中高表达的circ ZBTB10,通过q RT-PCR检测circ ZBTB10的组织表达规律,发现circ ZBTB10在杏花鸡心、肝、肾、胸肌和腿肌多个组织中均有高表达。本文通过构建circ ZBTB10过表达载体p CD25-circ ZBTB10及合成干扰片段si-circ ZBTB10,研究了circ ZBTB10对家鸡DF-1细胞、ICP细胞、LMH细胞和原代成肌细胞增殖的影响。通过q RT-PCR和流式细胞术发现circ ZBTB10可以调节多种家鸡细胞的细胞周期进程,包括促进细胞周期调控基因Cyclin B2、Cyclin D1、Cyclin D2和PCNA的表达,抑制细胞周期调控基因CDKN1B和p21的表达,同时能促进胰岛素样生长因子1受体IGF1R的表达;进一步结合Ed U染色实验,证实circ ZBTB10能够促进多种家鸡细胞的增殖。通过q RT-PCR,我们发现了circ ZBTB10在鸡原代成肌细胞增殖分化期的差异表达,同时鸡原代成肌细胞中过表达和干扰circ ZBTB10后发现circ ZBTB10能够促进肌肉分化相关基因Myo D、MYOG、My HC和Myomaker的表达。本文还研究了circ ZBTB10的编码潜力,通过预测circ ZBTB10跨越接头序列的开放阅读框ORF1,构建了带FLAG标签的circ ZBTB10过表达载体p CD2.1-circ ZBTB10-FLAG和多个实验对照载体,发现circ ZBTB10不能编码预测的多肽ZBTB10-190aa。综上所述,本研究发现了circ ZBTB10在多种家鸡细胞中的调控作用,同时研究了circ ZBTB10的编码潜力,为深入研究circ RNA对家鸡生长发育的影响提供了新的理论依据和探索方向。
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