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我们在临床对器官移植患者进行血药浓度监测时发现，主要成份为五味子甲素的制剂五酯胶囊（含五味子甲素＞85％）能够明显升高由细胞色素P450 3A（CYP3A）代谢的药物他克莫司的全血药物浓度。为了探明这一药物相互作用的机理，我们以SD大鼠为动物模型，用不同剂量的五味子甲素进行处理，测定处理后CYP3A活性的变化，以观察五味子甲素是否通过直接作用于CYP3A而引起他克莫司血药浓度的改变。 一、鼠肝微粒体中CYP3A活性检测方法的建立 本研究以CYP3A将睾酮羟化为6β-羟化睾酮的能力来代表CYP3A的活性。取健康成年SD大鼠肝脏，差速离心法制备肝微粒体，微粒体蛋白定量至20mg／ml，用于建立鼠肝微粒体孵育反应体系。反应体系总容积为500μl，其中包括大鼠肝微粒体1.0mg／ml、100mM Tris-HAc（pH 7.4）、1mM NADPH、不同浓度的睾酮（25、50、100、200、400mM）。在37.0℃预孵育5min，随后加入NADPH，37.0℃孵育30min，加入25μl高氯酸终止反应，3000g离心5min，取上清液用0.45μm微孔滤膜滤过后用于高效液相色谱检测。每只大鼠肝微粒体作3个平行管进行实验。然后采用高效液相色谱法测定大鼠肝微粒体孵育反应体系中生成的6β-羟化睾酮的浓度。色谱分析采用Hypersil-BDS C18 5μm200mm×4.6mm色谱柱，流动相组成为甲醇、乙腈和水，流速为1ml／min，紫外检测波长254nm，柱温室温。 结果显示：鼠肝微粒体的内源性物质及代谢物均不干扰样品的测定；标准曲线呈良好线性，R2＞0.99；用此方法测得正常大鼠肝CYP3A的Vmax和Km分别为（412.28±65.60）pmol／min／mg和168.01±17.31μmol／L。结论：本研究所建立的方法可以用于鼠肝微粒体中CYP3A活性的检测，该方法具有①取材方便，检测结果稳定、可重复性好；②特异性好；③精确度高等优点。 二、五味子甲素对大鼠肝CYP3A活性的影响 60只雄性大鼠根据体重排序，随机分配到12组，每组各5只。9组实验组分别给予五味子甲素5.625mg／kg、11.25mg／kg和22.5mg／kg灌胃3天、6天和9天，同期给对照组灌饮生理盐水。灌药时间结束后，禁食12h以上，处死动物，取出肝脏，匀浆后用差速离心法制备肝微粒体，Lowry法测定鼠肝微粒体蛋白浓度，并将蛋白浓度调至20mg／ml。液氮冷冻保存。 按照第一部分所述的方法测定五味子甲素处理后大鼠肝CYP3A活性的变化，结果