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喉癌是目前一种常见的头颈部恶性肿瘤，近年喉癌发病率逐年增加。PDTC(Pyrrolidinedithiocarbamicacid)是一种金属螯合剂和抗氧化剂，被用于各种癌症治疗的研究。硫辛酸(Lipoicacid，LA)是一种天然抗氧化剂，其化学名称为1，2-二硫戊环-3-戊酸，目前主要用于糖尿病、高血压等慢性疾病的防治，近年研究发现硫辛酸有抗肿瘤作用。多种手段综合治疗是目前肿瘤治疗的有效手段，本实验以Hep-2细胞为材料，研究LA在与PDTC联合处理中对细胞增殖的影响。 为了探究硫辛酸(LA)是否能促进吡咯烷二硫代氨基甲盐酸(PDTC)抑制肿瘤细胞增殖，体外培养人喉癌细胞系Hep-2细胞，加入LA、PDTC或LA+PDTC作用12，24和48h后，用WST-1法和软琼脂集落形成法检测细胞增殖，Hoechst33258染色法和流式细胞术检测细胞凋亡和细胞周期。结果发现LA5～500μM对Hep-2细胞增殖无抑制作用，PDTC5～50μM能明显抑制Hep-2细胞增殖，PDTC5μM联合LA5，10，20和40μM对Hep-2细胞增殖的抑制率明显高于对照组和PDTC单独处理组。PDTC5μM与LA5μM联合用药时，在12～48h范围内对Hep-2细胞增殖的抑制率呈现时间依赖性，24h后软琼脂细胞集落形成数与PDTC单独处理和LA单独处理组相比明显减少。Hoechst33258染色和流式细胞仪检测结果表明，与PDTC和LA单独处理组比较，PDTC5μM与LA5μM联合用药24h凋亡细胞增加，G2/M期细胞百分率增加。实验说明LA能够促进PDTC抑制Hep-2细胞增殖，并诱导其凋亡。为进一步研究其调控机制，通过PCR检测IFI16基因表达，设计IFI16基因shRNA序列，构建IFI16基因干扰表达载体pGreenPuro-IFI16shRNA，转染并建立pGreenPuro-IFI16shRNA/Hep-2和pGreenPuro-ControlshRNA/Hep-2细胞系，在细胞系基础上通过WST-1检测LA和PDTC联合处理对Hep-2细胞细胞增殖的影响，平板检测集落形成能力，Hoechst33258染色检测细胞凋亡，结果显示LA和PDTC联合处理Hep-2细胞24h后，IFI16基因表达升高;成功构建IFI16基因干扰表达载体pGreenPuro-IFI16shRNA及稳定表达该载体的Hep-2细胞系;IFI16基因干扰后，LA和PDTC联合处理对Hep-2细胞增殖抑制率的影响明显降低，抑制细胞集落形成能力和促进凋亡作用也有所减弱，说明IFI16基因在LA和PDTC联合治疗抑制Hep-2增殖中发挥一定作用。最终得出，LA促进PDTC抑制Hep-2细胞增殖，诱导其凋亡，二者联合处理后可能通过上调IFI16基因表达促进肿瘤细胞的凋亡，从而抑制细胞增殖发挥抗肿瘤活性。 本实验以Hep-2细胞为材料，通过LA与PDTC联合处理，更有效地抑制喉癌等恶性肿瘤的生长，并初步探知IFI16基因在其中起一定的调控作用，为喉癌的综合治疗，以及LA在肿瘤综合治疗中的应用提供借鉴。