【摘 要】
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(1)葡萄糖能在生理条件下以非酶学的形式与蛋白发生反应，在高血糖的糖尿病病人身上，这种糖基化更为严重，并且引起多种并发症。人血清白蛋白(HSA)是血浆中最为丰富的蛋白之一，并且
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(1)葡萄糖能在生理条件下以非酶学的形式与蛋白发生反应，在高血糖的糖尿病病人身上，这种糖基化更为严重，并且引起多种并发症。人血清白蛋白(HSA)是血浆中最为丰富的蛋白之一，并且其会被葡萄糖所糖基化。我们测定了重组人血清白蛋白∶葡萄糖和人血清白蛋白∶果糖两种复合物晶体结构。我们发现这两种晶体结构中都存在线性结构和环形结构的单糖分子。其中，线性的葡萄糖分子与Lys195形成共价键，但是环状葡萄糖分子却没有发生上述反应。基于这些结构，我们提出了人血清白蛋白上的Lys195和Lys199共同参与葡萄糖开环的结构机制。这些结论有助于我们理解葡萄糖开环过程和蛋白被单糖糖基化的分子机制。 (2)11-(dansylamino) undecanoic acid(DAUDA)是一种丹磺酰类的荧光探针，被广泛应用于测定人血清白蛋白结合位点。我们解析了rHSA∶Myr∶DAUDA三元复合物的晶体结构，并观察到两个DAUDA分子分别结合在人血清白蛋白6，7位的鹰肪酸结合位点上，并且这两个结合位点是人血清白蛋白结合脂肪酸较弱的结合位点。这一结构表明DAUDA分子是人血清白蛋白6，7位脂肪酸结合位点上的探针，而非文献报道的1位脂肪酸（胆红素结合位点）结合位点上的探针。 (3)溶血磷脂(lysoPLs)是细胞膜的代谢物，参与多种重要生理病理的过程。溶血磷脂酰胆碱(LPC)是溶血磷脂中的一种重要的成分。在生理过程中，LPC主要以结合态的形式存在，其中包括结合人血清白蛋白。这种结合可能用来调节LPC的活性，比如减少LPC引起的细胞毒性。目前，LPC如何结合人血清白蛋白的相关机制并不清晰。在本研究中，我们通过荧光淬灭法和光干涉计量法两种实验方法发现LPC能够与人血清白蛋白结合，并测量得到它们之间的解离常数约为25μM。我们还测定了在14碳的脂肪酸存在或者不存在的情况下，人血清白蛋白与LPC的复合物晶体结构。在rHSA∶LPC二元复合物晶体结构中，6个LPC分子分别结合在人血清白蛋白脂肪酸结合位点上。rHSA∶Myr∶LPC三元复合物结构表明在脂肪酸存在的情况下，LPC仍然会结合在人血清白蛋白1，3，5位脂肪酸结合位点上。此项研究明确了人血清白蛋白可以作为溶血磷脂运输载体的观点，并且提出溶血磷脂结合人血清白蛋白的结构机制。
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