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凋亡是急性心肌缺血再灌注过程中心肌细胞的死亡形式之一。细胞凋亡是一种能动性的生理性细胞死亡过程,为一系列基因活动引起的级联反应的结果,具有特征性的形态和生化改变。因此,深入研究急性心肌缺血再灌注过程中的细胞凋亡现象及有效的干预措施,对心肌缺血再灌注损伤(Ischemic Reperfusion Injury IRI)的防治具有重要意义。 中药巴戟天(Radix Morindae officinalis,RMO)是茜草科巴戟属植物巴戟天(Morindae officinalis How,MOH)的干燥根,具有补肾阳、壮筋骨、祛风湿等功效。以往的研究证实巴戟天对冠状动脉结扎法和体外培养的心肌细胞缺血再灌注损伤具有明显的保护作用,但巴戟天能否抑制缺血再灌注过程中的心肌细胞凋亡,目前尚未见报道。本课题采用离体纯化培养的乳鼠心肌细胞建立缺氧复氧(Anoxia-reoxygenation,A/R)模型,模拟在体的心肌缺血再灌注,观察在该模型上心肌细胞的凋亡现象及巴戟天正丁醇提取物(n-butanol extrate of Radix Morindae officinalis,BEM)对缺氧复氧乳鼠心肌细胞凋亡的影响,并探讨其作用机制。以丹参注射液(Salvia M ilitorrhizo injection,SMII)为阳性对照。 方法 实验采用新生1-3d的Wistar大鼠的乳鼠,雌雄不拘,在无菌条件下开胸取出心脏,PBS缓冲液洗涤,剪碎心肌,用0.125%胰蛋白酶分次消化成单细胞悬液,离心收集沉淀,用含15%胎牛血清培养液悬浮分散细胞,差速贴壁法纯化后制成浓度为5×105·ml-1的细胞悬液,接种到25ml培养瓶中培养,实验采用培