辣椒CabZIP1转录因子的功能分析

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bZIP是植物较大的转录因子基因家族之一,在植物生长发育和抗逆防御反应中起着十分重要的调节作用,但迄今对该家族的大部分成员的功能还所知甚少。辣椒是一种重要的茄科植物和具有重要经济价值的蔬菜,也是病害十分严重忌连作的作物。鉴于bZIP在植物生长发育和对逆境抗性方面的可能重要作用,分析辣椒bZIP家族不同成员有利于揭示辣椒生长发育及抗逆的分子机制。因此,在本实验室前期分离获得辣椒CabZIP1的全长cDNA并构建成其相应超表达载体、病毒介导基因沉默载体的基础上,本研究进一步通过荧光定量PCR分析了该基因在不同逆境胁迫及外源激素处理下的表达,并通过超表达和病毒诱导基因沉默(VIGS)的方法分析了其功能,主要研究结果如下:1、通过荧光定量PCR分析CabZIP1基因在各种逆境胁迫下的辣椒幼苗中的表达,结果表明在低温、NaCl和H2O2处理下,CabZIP1基因表达量相对上调;外源SA处理CabZIP1基因的表达量明显下调;机械损伤后6h内CabZIP1基因的转录表达明显升高,6h后则下降。2、构建CabZIP1基因超表达载体共获得T0代植株45棵并获得其相应的T1代株系的足够种子。利用T1代转基因株系研究CabZIP1超表达对转基因烟草对逆境抗性的影响,发现CabZIP1基因在烟草中超表达可提高烟草对NaCl的抗性,并对外源ABA处理表现出一定程度的抗性,对青枯菌接种表现出易感,但对高温和低温的抗性与其野生型对照无明显差异。这些结果说明CabZIP1是植物抗盐胁迫的正调节因子,但却是对病原菌侵染抗性的负调节因子;采用荧光定量PCR研究表明,CabZIP1在烟草中超表达使203、515、H1N1和PR1等病程相关基因表达下降,而201和PR3的表达升高,对PR2表达没有明显的影响。3、病毒诱导基因沉默(Virus induced gene silence, VIGS)研究表明CabZIP1基因沉默可一定程度提高植株对青枯菌侵染的抗性,但对盐胁迫则较对照更为敏感。上述结果表明CabZIP1是辣椒抗盐胁迫的正调控因子,是抗青枯病的负调节因子。
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