增强抗肿瘤单区抗体靶向性及活性和策略及应用

• 作 者: 朱学锴
• 机 构: 中国科学院大学
• 出 处: 中国科学院研究生院 中国科学院大学
• 发表日期: 2010年期

单区抗体是一类新型的小分子抗体,拥有易操作和识别隐藏的抗原位点等优点。但是其较低的亲和力和“毒性”不足限制了在临床上广泛地应用。本研究从提高单区抗体的功能亲和力(avidity)和增强单区抗体的生物活性两方面尝试对单区抗体进行工程改造。　　
第一,利用多聚化来提高单区抗体的功能亲和力。为了避免在重组抗体中引入免疫原性,我们选择了一段来自人软骨多聚基质蛋白的卷曲螺旋多肽COMP48作为多聚化骨架。我们将这种新型的重组抗体分子命名为combody,它是由来自于天然的骆驼单区抗体库的单区抗体和COMP48构成的融合蛋白。combody实现了单区抗体的五聚化。同时保留了其单区抗体部分的抗原结合特异性。单区抗体转化成combody后,功能亲和力得到了极大的增强。从而使得低浓度combody仍可以特异性识别细胞表面的抗原。　　
第二,尝试增强单区抗体在靶向治疗中生物活性。我们使用了两种不同的策略,分别构建了以单区抗体作为靶向组件之一的双特异抗体和免疫毒素。首先在combody的工作基础上我们构建了一种新型的双特异多价抗体MCC,方法是在COMP48两端同时连接不同的抗体片段,N端是抗黑色素瘤特异性HLA-A2/MART-1复合物的单区抗体,C端是抗人CD3分子的单链抗体。MCC在体外可介导T细胞特异性杀伤表达MART-1-HLA-A2复合物的T2靶细胞。我们还构建了一种新型的小分子免疫毒素,它以靶向肿瘤的单区抗体作为载体部分,绿脓杆菌外毒素衍生物PE38KDEL作为毒性部分,免疫毒素在体外可显著抑制黑色素瘤细胞系Malme-3M的增殖。　　
因此,本研究基于上述策略成功地优化改造了单区抗体的靶向性和生物活性,为开发有临床应用价值的单区抗体药物奠定了基础。