【摘 要】
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背景：既往研究证实脑部炎症反应参与了癫痫的发生、发展,与癫痫所致脑组织损伤密切相关。药物转运体P糖蛋白(P-glycoprotein, P-gp)被认为是导致耐药性癫痫(drug-resistant ep
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背景：既往研究证实脑部炎症反应参与了癫痫的发生、发展,与癫痫所致脑组织损伤密切相关。药物转运体P糖蛋白(P-glycoprotein, P-gp)被认为是导致耐药性癫痫(drug-resistant epilepsy, DRE)的重要机制之一,亦与炎性转录因子核因子κB (nuclear factor kappa B, NF-1κB)活化有关。新近研究发现癫痫脑内可产生大量高迁移率族蛋白B1(high mobility group box1, HMGB1), HMGB1作为损伤相关分子模式成员之一,作用于模式识别受体介导免疫炎症反应,调控NF-κB活性,我们前期研究发现癫痫脑内P-gp过表达与NF-κB活化有关,抑制NF-κB活性可下调P-gp表达,那么,HMGB1能否调控P-gp蛋白的表达?目的：观察拮抗HMGB1对癫痫大鼠癫痫样发作、神经损伤、星型胶质细胞活化的影响,探讨HMGB1是否能通过活化NF-κB调控癫痫大鼠脑P-gp表达。方法：将雄性SD大鼠分为假手术组(sham组,n=5),癫痫模型组(EP组,n=8),1400ng BoxA(HIMGB1拮抗剂)干预组(B1400组,n=8),140ng BoxA干预组(B140组,n=8),14ng BoxA干预组(B14组,n=8)。侧脑室注射BoxA进行干预,sham组和EP组仅注射NS; BoxA干预后15min向海马注射海人酸(kainic acid, KA)制作癫痫模型,sham组仅注射NS。记录各组大鼠达到Ⅲ级癫痫发作的时间(seizure onset time, SOT)评价癫痫易感性。造模后24h取大鼠脑组织,H.E.染色大体观察脑组织损伤,神经元核抗原(neuronal nuclei, NeuN)染色评价神经损伤程度,胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein, GFAP)染色评价星形胶质细胞活化,HMGB1、p-NF-KB-p65、P-gp染色观察BoxA干预对他们表达水平的影响。主要结果：(1)各BoxA干预组SOT均较EP组延长(P<0.05)；(2)各BoxA干预组神经元损伤、丢失程度较EP组轻(P<0.05)；(3)EP组星形胶质细胞肿胀,各BoxA干预组GFAP表达少于EP组(P<0.05)：(4)5组之间总体比较,HMGB1表达水平差异无统计学意义。EP组海马神经元未见HMGB1表达,而胶质细胞、内皮细胞等HMMGB1表达增加；BoxA干预组神经元有不同程度HMGB1表达,而胶质细胞、内皮细胞HMGB1表达少于EP组；(5)各BoxA干预组P-gp表达少于EP组(P<0.05)。(6)B1400组、B140组p-NF-κB-p65表达少于EP组(P<0.05),B14组表达有少于EP组的趋势,但差异未显示统计学意义；结论：HMGB1拮抗剂BoxA可：降低大鼠的癫痫易感性；减轻神经元损伤,减轻星形胶质细胞肿胀、活化,具有神经保护作用;抑制NF-KB活化,降低P-gP表达。结合我们既往的研究,BoxA可能通过抑制HMGB1,减少其诱导的NF-κB活化及下游P-gp表达。
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