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中医中药是中华民族的瑰宝。中药有效成分的提取、分离、纯化技术以及制剂技术的改进是中药现代化的重要组成部分。射干是一种被列为国家重点发展的中药材,对流感病毒、腺病毒、咽喉病毒有显著抑制和杀灭作用,在临床中应用广泛。本文应用现代化实验与分析技术,对射干中生理活性成分的提取和分离提纯过程及其特性进行系统研究,提出一条利用超声场强化提取、大孔树脂分离的技术路线,成功地从射干中分离得到鸢尾苷类的生物活性物质,并通过其清除自由基和抗油脂氧化作用的研究,发现和验证了射干提取物鸢尾苷有良好的体外抗氧化作用。主要研究内容与结果如下:
一、中草药射干活性成分鸢尾苷的提取
对射干中鸢尾苷的乙醇回流、超声辅助提取以及大孔吸附树脂分离过程进行系统地研究,并制得比较纯的鸢尾类产品。
在单因素试验的基础上通过正交实验,探讨超声条件下不同参数(超声功率、超声时间、乙醇浓度、液固比等)对提取率的影响,优化超声辅助提取得到最佳的工艺条件为:超声功率180w、乙醇浓度为70%、液固比为9:1mL/g,处理时间60min。并探讨研究超声强化提取的机理。
二、异黄酮鸢尾苷的富集分离
通过动力学和静态试验,筛选出XDA-1大孔树脂对射干提取液进行吸附,对鸢尾苷的吸附平衡和吸附动力学进行了研究。最佳的吸附分离条件为:上柱流速4mL/min,pH值为5.30,浓度为19mg/L。根据射干提取液在各种洗脱剂中的静态洗脱实验,选择70%的含水乙醇作为洗脱剂。通过吸附、洗脱实验,对鸢尾苷进行了富集分离。
三、鸢尾苷的性质与结构初步分析
采用多次索式抽提和重结晶对大孔树脂富集产物进一步纯化得到样品中含两个组分。经物理定性、化学反应、紫外光谱、高效液相色谱以及液质联用分析,由样品与标准品的HPLC图对比,以及样品的有关检测质谱图,推断出一个组分为鸢尾苷,另一个为鸢尾苷元。
四、鸢尾苷抗氧化活性的研究
选择氧自由基清除、羟基自由基清除、二苯代苦味肼基自由基清除、烷基自由基清除和抗油脂氧化作用等实验体系对鸢尾苷进行抗氧化活性的试验,发现鸢尾苷有较显著的抗氧化作用。纯化得到的鸢尾苷的抗氧化作用比维生素C的稍强。