【摘 要】
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本论文通过对纤维素内切酶EGⅢ基因的克隆，构建了重组质粒pPIC9K-EGⅢ，并对重组蛋白在Pichiapastoris中的表达情况进行了研究，建立了纤维素内切葡聚糖酶EGⅢ在Pichiapastoris中
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本论文通过对纤维素内切酶EGⅢ基因的克隆，构建了重组质粒pPIC9K-EGⅢ，并对重组蛋白在Pichiapastoris中的表达情况进行了研究，建立了纤维素内切葡聚糖酶EGⅢ在Pichiapastoris中的表达系统；在此基础上通过对含有不同EGⅢ基因拷贝数的工程菌株的生长和表达情况进行了研究，试图探讨插入基因剂量的不同对纤维素内切葡聚糖酶EGⅢ在Pichiapastoris中表达的影响。在酶动力学方面，根据蛋白质在固体表面吸附、钝化理论建立了纤维素酶动力学模型，并试图通过EGⅢ的反应动力学对该模型进行拟合，确定模型中各项参数的EGⅢ数值解。
本研究工作为今后的纤维素酶酶学研究提供了相应的实验基础；并为下一步开展纤维素内切酶EGⅢ的定向进化工作提供了实验指导；也为进一步建立多种纤维素酶在酵母中的共表达研究提供了相应的理论基础。
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