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目的:通过构建大鼠脑出血模型,观察NogoA和Pir B两种蛋白在脑出血大鼠脑组织中不同时间点的定量表达、PirB表达的时空特点、轴突再生情况、大鼠神经功能缺损情况,探讨PirB的表达对脑出血损伤大鼠轴突再生和神经功能的影响、NogoA和PirB蛋白表达的相关性,推测Nogo A-PirB通路与神经功能缺损的相关性,探讨脑出血损伤后脑组织的修复机制,进一步探索脑出血后治疗靶点,为临床治疗研究提供理论依据。方法:雄性SD大鼠75只,随机分为假手术(Sham)组(n=25)和脑出血(ICH)组(n=50),两组分别按断头取脑时间点不同分为1d、3d、7d、14d、28d共5个亚组,各时间点脑出血大鼠随机分为Western Blot组和组织免疫荧光组。Sham组大鼠颅骨钻孔后不注射血液,脑出血组以大鼠自体鼠尾动脉不凝血50ul,经改良二次注入法建立大鼠脑出血模型,术后3小时通过神经功能评分判定造模成功与否。造模成功后,各时间点大鼠采用Garcia神经功能障碍评分方法进行评分后断头取脑。Western Blot组脑组织取出后立即液氮冷冻,随后转入-80℃冰箱冻存备用,研磨组织提取蛋白后,采用蛋白免疫印迹法(Western-blot)测定PirB和NogoA蛋白的表达;组织免疫荧光组大鼠深度麻醉后予以PBS和4%多聚甲醛灌注后取脑,取出脑组织经后续处理后行石蜡切片和冰冻切片,分别行HE染色和免疫荧光。结果:(1)、脑出血组神经功能缺失评分明显低于对应时间点Sham组,以3d组神经功能缺失评分最低,以上结果统计学差异具有显著性(P<0.05)。(2)脑组织形态结构改变:Sham组脑组织中可见神经细胞完整。脑出血组1d亚组病灶内充满红细胞,病灶周围水肿明显伴少量炎细胞浸润;3d亚组血肿红细胞减少,病灶周围神经元肿胀坏死明显,大量炎细胞浸润;7d亚组血肿进一步吸收,周围水肿有所减轻,炎细胞减少,胶质细胞大量增生;14d、28d亚组血肿吸收,见明显胶原纤维增生及修复瘢痕。(3)NogoA和PirB定量分析:脑出血组各时间点NogoA、PirB表达均高于对应时间点的Sham组;二者在脑出血后表达明显增加,并在脑出血后7天达到表达高峰,持续高水平表达至28d,差异具有统计学意义(P<0.05)。(4)、双标免疫荧光:PirB在脑出血组各时间点均有表达,主要表达在神经元细胞、轴突及星形胶质细胞;脑出血组出现明显轴突断裂、紊乱等损伤表现,轴突长度较正常对照组明显缩短,持续至脑出血后28天无明显改善,与Sham组差异具有统计学意义(P>0.05)。(5)、脑出血组各时间点NogoA、PirB表达与神经功能评分和轴突长度呈负相关。结论:(1)正常成年大鼠脑组织中可见少量NogoA、PirB表达,主要表达于神经元及星形胶质细胞,维持神经功能的稳定。(2)脑出血可诱导NogoA、PirB表达增加,NogoA-PirB通路可抑制轴突再生,阻碍脑出血后的神经功能恢复。