论文部分内容阅读
目的①观察高脂血症(hyperlipidemia)大鼠海马内神经元的光镜结构和超微结构改变；②观察高脂血症大鼠海马神经元内nNOS(neuronal nitric oxide synthase，nNOS)及NT-3(neurotrophin-3，NT-3)表达的变化；③探讨高脂血症与某些神经退行性疾病的关联及其可能机制。方法 将SD大鼠随机分为对照组(10只，饲以普通饲料)和实验组(10只，饲以高脂饲料)，饲养6周后抽血测血脂，并灌注固定取脑组织，进行光镜、电镜、nNOS及NT-3免疫组织化学观察。并应用计算机图像分析系统对免疫组化结果进行定量分析，比较两组海马各区平均光密度(MOD)值，用SPSS10.0软件统计分析实验结果。结果①与对照组血清总胆固醇(1.58±0.53mmol／L)及血清低密度脂蛋白胆固醇(0.07±0.1 0mmol／L)比较，实验组血清总胆固醇(6.65±2.61mmol／L)及血清低密度脂蛋白胆固醇(4.41±2.21mmol／L)升高明显，差异具有显著性(P＜0.01)。而血清甘油三酯、极低密度脂蛋白胆固醇、高密度脂蛋白胆固醇无显著性变化。②在HE染色切片中，可见对照组大鼠海马皮质由分子层、锥体细胞层和多形细胞层构筑而成。锥体细胞层中以锥体细胞数量最多，其中散在有各种形态的小神经细胞。齿状回也分三层，即分子层、颗粒细胞层和多形细胞层。其中颗粒细胞层主要由数层紧密排列的颗粒细胞构成，细胞核小而圆。实验组大鼠海马光镜结构未见明显变化。③电镜下，与对照组相比，实验组大鼠海马内神经元超微结构出现一系列病理学改变：粗面内质网扩张、断裂成囊泡状，核糖体脱颗粒；线粒体肿胀，双层膜结构不清，线粒体嵴断裂；高尔基复合体肿胀，极性消失；突触前、后膜不清晰，也存在有小清亮型和大致密核芯型两种类型的突触小泡，但清亮型略有减少。髓鞘呈水肿状，髓鞘板层松松散，周期间线的间隙加大增大。毛细血管内皮细胞中部分粗面内质网、高尔基复合体、线粒体可见明显的扩张。脂滴明显，呈多泡状聚集于神经元内或呈单泡状出现于轴突及间质中。④免疫组化染色可见对照组大鼠海马中nNOS免疫反应阳安徽医科大学硕士学位论文性神经元散在分布于海马锥体细胞层和齿状回颗粒细胞层中，数量少。实验组nNOS免疫反应阳性细胞数增多，尤以海马CA3区明显，阳性神经元呈带状密集分布。对照组NT-3免疫反应阳性神经元群集于海马锥体细胞层及齿状回颗粒细胞层中，呈强阳性反应。实验组NT-3免疫反应阳性细胞数量减少，免疫反应强度减弱，尤以海马CAI区最为明显。⑤图像分析结果表明:与对照组相比，实验组海马各区咖05免疫阳性神经元MOD值升高，尤以CA3区明显;NT-3免疫阳性神经元MOD值降低，以CAI区最为显著。结论①血脂检测结果表明高脂血症大鼠血脂中胆固醇和低密度脂蛋白水平明显升高，此结果类似于临床上na型高脂血症。表明造模成功。②高脂血症可诱导大鼠海马内神经元出现一系列超微结构病理学改变。③高脂血症大鼠海马中nNOS表达增强而NT-3表达减弱。④高脂血症可导致海马内神经元结构和功能均出现异常改变，为今后进一步探讨血脂代谢异常与中枢神经系统的神经退行性病变关系提供了形态擎依据。