基于胶滴肿瘤药敏检测技术的乳腺癌细胞对三氧化二砷和粉防己碱敏感性的研究

来源 :北京中医药大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:w818150
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
目的:建立胶滴肿瘤体外药敏检测技术,并将其应用于肿瘤的中药单体实验研究中。评价三氧化二砷和粉防己碱对乳腺癌MCF-7细胞的作用效果,为三氧化二砷和粉防己碱的临床应用奠定理论基础。   方法:   1.肿瘤细胞悬液制备:将乳腺癌MCF-7细胞传代,待细胞生长状态良好时,置于50ml离心管中,加入10ml组织消化酶,于37℃培养箱中,消化2-3小时。消化完毕后,通过16目的筛网过滤,获得单细胞悬液。   2.肿瘤细胞的原代单层培养:将上述细胞悬液加入到I型胶原蛋白包被的细胞培养瓶中培养24小时,弃上清中未贴壁的死细胞。   3.胶原蛋白凝胶内培养:将细胞用胶原酶消化后,收集活细胞并计数,调整到细胞浓度为1×105个/ml。在冰浴的条件下,将胶原蛋白-细胞混合溶液接种于6孔细胞培养板,每孔均接种3滴(30μl/滴),接种量为3000个细胞/滴,将培养板置于细胞培养箱内1小时以形成胶滴。加入含10%胎牛血清的DMEM培养基,进行培养。   4.待测药物的添加:细胞培养板置于5%CO237℃细胞培养箱内培养24小时后,分为三氧化二砷组、粉防己碱组、三氧化二砷+粉防己碱组、空白组,在培养板中分别加入不同浓度三氧化二砷组、粉防己碱组、三氧化二砷和粉防己碱,同时设不加药阴性对照孔。培养24小时后清洗除去药物后,无血清培养7天。   5.结果测定:中性红染色固定、扫描,结果传输计算机。利用图像软件分析药物的抑制率,评估药物体外杀伤作用。   6.结果评价:通过图像软件,对图像进行分析。对亮度值在0-128之间的肿瘤细胞形成的克隆进行光密度的计算(OD),结果传输到计算机,计算出分析药物的抑制率。   OD=log10(投射光总量/透射光总量)   药物体外敏感性用T/C的百分比值表示,其中T为加药处理组的光密度值,C为空白对照组光密度值。如果T/C的百分比值≤50%则认为药物在体外敏感。根据药物对乳腺癌MCF-7细胞的作用分别分为敏感(S)和耐药(R)。   结果:成功建立了胶滴肿瘤药敏检测技术,明确了三氧化二砷和粉防己碱对肿瘤细胞的抑制率,并确定了胶滴肿瘤体外药敏检测技术的可靠性。   结论:国内外研究结果表明胶滴肿瘤药敏检测技术检测的标本可评价率高,检测结果与临床研究相关性好。本课题将胶滴肿瘤药敏检测技术用于中药单体的研究,评价了中药单体杀伤肿瘤细胞的有效性,对抗肿瘤中药的筛选以及为乳腺癌的中药治疗奠定理论依据。且采用国内已经广泛使用于细胞学实验的四甲基偶氮唑盐比色法验证实验结果,验证胶滴肿瘤药敏检测技术在中药研究中的可行性。
其他文献
文化大革命以来,农业学大寨运动深入开展,我省小麦连年丰收,产量迅速提高,进一步解放了人们的思想。郑引1号就是近年在关中地区群众性科学实验中鉴定出来的高产品种。 Sinc
为了能更仔细地观察菊花,我便拿了几朵风干的花进行研究.rn风干的菊花,很不讨人喜欢,没一点光泽.干枯的花瓣可怜巴巴地靠着中间淡绿色的花蕊,没有一点儿水分,只能紧紧地贴一
期刊
目的:分析120急救过程中出现纠纷的原因,并提出相应的防范措施.方法:此次选择2018年1月-2019年1月我院120急救接诊患者90例作为研究对象,根据出诊时间先后分为观察组与对照组
目的:将延续性护理干预对出院肿瘤患者癌痛的控制效果进行评价分析.方法:选择2018年10月份至2019年10月份我院收治的肿瘤患者58例,所有患者均服用癌痛药物,并随机分为对照组2
羊柴,通称蒙古岩黄芪,豆科岩黄芪属,多年生半灌木治沙与饲用植物。零星分布于我国北部沙地地区。我区库布齐沙地、毛乌素沙地有野生群落生长。在清水河县人工种植已有近百年
“叮叮叮叮……”上课了,同学们纷纷走进教室,一位年轻的女老师也跟着进了教室,她就是我们的班主任田老师,也是我最敬佩的人.rn说她年轻嘛,那可是太年轻了,看上去也就20 岁左
期刊
前一天,杨老师给我们布置了一项任务——认识天平.回到家后,我兴奋地与爸爸一同在网上搜罗了关于天平的信息.了解了天平是依据杠杆原理制成的,在杠杆的两端各有一小盘子,左边
期刊
目的:观察 ICAM-1、NF-κBp65 与 sICAM-1 联合检测技术在诊断浆细胞性乳腺炎患者方面的价值.方法:选 100 例乳腺炎患者对其运用 CAM-1 、NF-κBp65 与 sICAM-1 联合检测,观
目的:分析探讨延续性护理干预对慢性肾功能衰竭血液透析患者的影响.方法:选取本院 60 例慢性肾功能衰竭血液透析患者,从 2018 年 1 月到2019 年 1 月,将 60 例患者分为参照组
目的:评价综合康复护理应用于大面积烧伤患者护理中的价值.方法:选取我院在2018年3月-2019年3月收治的156例大面积烧伤患者为研究对象,采取随机的方式将156例大面积烧伤患者