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Bacillus sp.HJ14和Bacillus sp.SD01、Bacillus sp.SD02分别筛选自云南和山东特殊环境土壤样本。通过对三株菌进行全基因组测序及注释分析,发现其基因组序列中含酯酶基因EstZ1、EstZ14和EstZ22。本研究成功克隆3段基因,并利用Escherichia coli BL21(DE3)进行异源表达,纯化得到重组酯酶EstZ1、EstZ14和EstZ22,同时对他们的酶学性质及对DBP、DEP、DiBP和DCHP的降解潜力进行了研究,具体研究结果如下:(1)重组酶Est Z1可以水解酰基链长度为2–10的人工合成pNP底物,最适底物是pNPC4;最适pH为9.0,在pH 5.0–9.5处理1 h酶活力仍剩余60%以上;最适温度为50℃,在40℃–70℃保持50%以上的酶活力,37℃和60℃时的热稳定性很好,80℃下半衰期为20 min;大多数金属离子和化学试剂对其活性影响较小,部分有促进作用;能催化水解DEP和DiBP的一个酯键生成相应的醇和单酯。(2)重组酶Est Z14可以水解酰基链长度为2–6的人工合成pNP底物,最适底物是pNPC4;最适pH为7.0,在pH 6.0–11.0处理1 h酶活力仍剩余60%以上;最适温度为45℃,在低于25℃和高于50℃时酶活较低(≤20%),37℃时的热稳定性良好;大部分金属离子及化学试剂对其活性无影响或影响微弱。(3)重组酶Est Z22可以水解酰基链长度为2–8的人工合成pNP底物,最适底物是pNPC4;最适pH为9.0,在pH 6.0–9.0处理1 h酶活仍保持60%以上;最适温度为70℃,37℃时的热稳定性很好,60℃下半衰期为40 min,70℃下处理15 min酶活还剩余40%以上;大多数金属离子和化学试剂对其活性均影响不大,少数有促进作用;对DEP、DiBP、DBP和DCHP有水解活性。本研究获得3个酯酶EstZ1、EstZ14和EstZ22。其中,EstZ1和EstZ22均为嗜热酶并且对DEP、DiBP、DBP和DCHP有水解活性。嗜热酯酶包含了嗜热酶和酯酶的双重性质,在食品工业、生物医疗、环境治理等方面有着非常巨大的应用潜力。