苯并（a）芘暴露促进胎盘海绵滋养层细胞的增殖导致胎盘功能紊乱

• 作 者: 邓婷
• 出 处: 重庆医科大学
• 发表日期: 2020年12期
• 关键词: BaP 胎盘 外胎盘锥 TPBPA~+细胞 发育毒性

目的:苯并(a)芘(benzo(a)pyrene,BaP)是一种环境雌激素内分泌干扰物。已有研究发现孕期BaP暴露会导致胚胎着床数减少,胚胎丢失并干扰胎盘滋养细胞的增殖分化。胎盘在胚胎发育中起着能量供给,废物转运的作用,胚胎的发育离不开结构和功能正常的胎盘。已有的BaP对胎盘影响的研究多基于对体外单一滋养细胞观察,忽略了胎盘形成过程中各滋养细胞间存在着相互作用。本研究旨在探讨BaP在体内胎盘形成过程中对滋养细胞的影响。方法:(1)构建孕鼠染毒模型:将妊娠小鼠从妊娠第一天开始按0.2、2.0mg/kg/d的BaP剂量进行连续灌胃染毒,同时设立对照组,分别于妊娠第9,12,14,18天进行取材。(2)应用HE观察各发育阶段胎盘的形态,应用ELISA检测胎盘分泌功能。(3)使用IHC、IF、Real-time PCR对胎盘形成中关键的增殖分化因子进检测。(4)使用Real-time PCR,PAS,HE对不同滋养细胞亚型的功能进行检测。(5)运用IHC、Western-blot对滋养细胞增殖分化的调控因子进行检测。(6)使用IHC、Western-blot对RBPJ、NOTCH1以及P110、P85、p-AKT表达进行检测。结果:(1)BaP暴露导致成熟胎盘结构改变,胚胎发育障碍。(2)BaP影响功能性胎盘的形成过程,E9天胎盘外胎盘锥结构改变,E12天胎盘各滋养层面积比例改变,胎盘激素分泌紊乱。(3)BaP影响外胎盘锥的增殖分化,增加了转录因子Mash2的表达,滋养巨细胞形态发生改变。(4)BaP导致TPBPA~+亚型滋养细胞分化比例失衡,使海绵滋养细胞过度增殖,糖原滋养细胞分布区域改变。(5)BaP增加了RBPJ和P110在胎盘中表达,促进了TPBPA~+滋养细胞向海绵滋养细胞的分化。结论:妊娠期BaP暴露导致了胎盘结构紊乱,使连接区面积增加、蜕膜层和迷路层面积减小,胎盘的分泌功能紊乱。这些变化引起胎儿生长受限和胚胎丢失的发生。通过对胎盘的形成过程进行观察发现BaP的干预破坏了EPC中胎盘滋养细胞增殖分化平衡。BaP干预后转录因子Mash2在胎盘内的表达增强,促进了TPBPA~+滋养细胞向着海绵滋养细胞的分化。Notch和PI3K-AKT信号通路可能参与了BaP诱导的EPC异常分化过程。