采油微生物的筛选、鉴定及性能研究

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微生物提高原油采收率(简称MEOR)是石油开采过程中利用微生物及其代谢产物将残留原油采出的方法。细菌原油开采技术中唯一得到使用的微生物。细菌体积小,生长迅速,耐高温、高盐和高压等恶劣地层环境的优点,并可通过其代谢产物如产生的气体、有机酸、表面活性剂和高聚物来提高原油的采收率。本课题的主要任务是分离筛选得到各方面性能较好的的采油微生物的细菌菌株,并对其采油方面的性能进行研究。从来自大庆油田石油污染的样品中,分离得到性能较为优良的三株兼性厌氧采油微生物——菌株DY-32、RD18及YD2。通过一系列形态学观察、生理生化实验和16S rDNA序列分析对三株降油菌株进行了菌种鉴定。结果表明,菌株RD18为铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa),菌株YD2和DY-32为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)。以菌株RD18及YD2为目的菌株,研究了其耐温、耐盐能力和在不同温度、盐度下对原油的利用和原油粘度改变情况。实验证明,两株菌在30℃-40℃的温度范围内均能在葡萄糖培养基中良好生长,并能利用石油为碳源生长和降低原油粘度。菌株YD2对高温的耐受力比菌株RD18好,其在40℃-45℃仍生长。在大多数温度条件下菌株YD2都比菌株RD18表现更高的降油率。在40℃YD2有最高的降油率为15.6%。而菌株RD18在原油的降粘方面最优,在40℃时表现最高的降粘率37.52%。盐度对两株菌的生长和原油降粘、降解均有较明显的影响,最适盐度是2%,此时菌株RD18有最高的降粘率38.5%,而菌株YD2有最高的降油率19.2%,过高盐度成为限制因素。对上述两株菌扩大培养过程种子培养基的氮源种类和用量地行优化实验,最终确定了对菌株RD18及YD2来说,最佳氮源是酵母粉,最适用量为0.05%。对菌株株YD2来说,棉子粉也是较好的氮源,最适用量为0.1%。对生产过程的无机氮源的利用情况进行了研究和优化,结果表明少量添加几种无机氮源对两株菌对原油的降解情况均无太大改善;而少量添加尿素则可以微弱加强两株菌对原油的降粘作用。
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