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败酱草属植物药中白花败酱草、黄花败酱草和异叶败酱三个物种的药理作用有很多报道,但有关白花败酱草在抗肿瘤方面的作用及其机制的研究,国内外尚未见报道。本研究以白花败酱草及其总皂苷为研究对象,采用体外培养瘤细胞株和体内荷瘤动物模型的方法,探讨白花败酱草对宫颈癌和胃癌的抗肿瘤作用及其机制。
本课题体内观察白花败酱草水提物和总皂苷对U14宫颈癌荷瘤鼠肿瘤的抑瘤率、对肿瘤细胞周期和细胞凋亡率(流式细胞术)的影响:H-E染色观察总皂苷诱导肿瘤组织细胞分化的程度；免疫组织化学SP法检测白花败酱草总皂苷诱导肿瘤组织细胞PCNA(细胞增殖核抗原)、p53(突变型p53)和bcl-2(B细胞淋巴瘤/白血病-2)基因表达的情况；放射免疫法(RIA)检测总皂苷对U14荷瘤鼠血清TNF-α(肿瘤坏死因子)和IL-2(白细胞介素-2)水平的影响；比色分析法检测总皂昔对荷瘤鼠血清T-AOC(总抗氧化能力)、SOD(超氧化物歧化酶)活性和MDA(丙二醛)含量的影响；观察白花败酱草水提物对U14荷瘤小鼠生存期的影响。结果表明：白花败酱草在体内剂量依赖性地抑制U14宫颈癌细胞增殖,并延长U14荷瘤鼠的生存时间；白花败酱草抑制U14宫颈癌细胞增殖的有效成分主要是总皂苷,通过提高血清。TNF-α、IL-2水平,下调凋亡调控分子bcl-2、p53和PCNA的表达,干扰肿瘤细胞的增殖周期,促进肿瘤细胞的凋亡实现抑制U14宫颈癌细胞增殖的目的。体外利用MTT法对白花败酱草水提物、醇提物、总皂苷、乙酸乙酯和正丁醇提取物的抗肿瘤活性进行筛选：观察白花败酱草总皂苷和各提取物对入宫颈癌Hela和人胃癌SGC7901细胞生长增殖的抑制作用；光镜和透射电镜观察总皂苷和乙酸乙酯提取物诱导Hela和SGC7901肿瘤细胞发生凋亡的情况：流式细胞仪检测总皂苷诱导Hela细胞周期的变化,采用琼脂糖凝胶电泳技术观察白花败酱草总皂苷、乙酸乙酯和正丁醇提取物诱导SGC7901细胞DNA的降解,采用端粒重复序列扩增的方法利用银染技术(TRAP银染法)检测白花败酱草水提液、皂苷、乙酸乙酯和正丁醇提取物诱导Hela细胞端粒酶活性的改变；观察总皂苷、乙酸乙酯和正丁醇提取物对Hela和SGC7901细胞Caspase-3(半胱天冬酶)活性的影响；Western blot技术检测白花败酱草总皂苷、乙酸乙酯和正丁醇提取物诱导Hela细胞Bcl-2蛋白质的表达；诱导SGC7901细胞Bcl-2和Bax蛋白质表达的情况。
结果表明：白花败酱草总皂苷在体外剂量依赖性地抑制Hela和SGC7901细胞的增殖,诱导细胞的凋亡,抑制其端粒酶的活性；并通过对凋亡调控分子bcl-2和bax表达水平的影响,对凋亡关键酶Caspase-3的激活,实现其促进Hela和SGC7901细胞凋亡的作用,达到抑制肿瘤细胞增殖的目的。结论：白花败酱草体内对U14富颈癌,体外对Hela和SGC7901细胞的生长有很好的抑制作用,白花败酱草总皂苷是发挥其抗肿瘤作用的有效成分。